[發明專利]β2-微球蛋白測定試劑盒

有效

• 申請號: 201711131903.3
• 申請日: 2017-11-15
• 公開（公告）號: CN107942068B
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 陳青松;林耀文
• 申請（專利權）人: 浙江夸克生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 黃福偉

1.一種β₂-微球蛋白檢測試劑盒，其特征在于：由彼此獨立的試劑R1和試劑R2組成；所述試劑R1的組分包括：緩沖劑、防腐劑和水；所述試劑R2的組分包括：包被β₂-微球蛋白抗體的乳膠顆粒、防腐劑和水；其特征在于：所述的乳膠顆粒為粒徑1.5-2.0μm的聚苯乙烯乳膠顆粒，每1升試劑R2中各組分的用量為：β₂-微球蛋白抗體的乳膠顆粒0.05-0.5mg，防腐劑0.2-10g；

所述試劑R2中還有聚六亞甲基胍和苯甲醇。

2.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：所述的緩沖液選自磷酸緩沖液、甘氨酸緩沖液、HEPES緩沖液、硼酸緩沖液或氯化銨緩沖液中的一種或幾種；防腐劑選自疊氮鈉、ProClin防腐劑中的一種或幾種。

3.按照權利要求2所述的檢測試劑盒，其特征在于：每1升試劑R1中各組分的用量為：緩沖劑5-100mmol，防腐劑0.2-10g。

4.按照權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于：每1升試劑R1中各組分的用量為：氯化銨20mmol，疊氮鈉0.95g；每1升試劑R2中各組分的用量為：β₂-微球蛋白抗體的乳膠顆粒0.18mg，疊氮鈉0.95g。

5.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：所述試劑R2中聚六亞甲基胍的用量為0.5g/l，苯甲醇的用量為0.2g/l。

6.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述包被β₂-微球蛋白抗體的乳膠顆粒的制備方法為：

（1）用MES緩沖液將表面帶有羧基功能基團、直徑1.5-2.0μm的聚苯乙烯微粒稀釋至終濃度為0.5-3%（wt），加入50-90mM EDAC，混合均勻，室溫震蕩反應30-80分鐘；

（2）將步驟（1）所得混合液離心，棄上清液，用MES緩沖液清洗兩次，最終膠乳微粒重懸于MES緩沖液，超聲進行分散，得微粒分散液；

（3）用MES緩沖液稀釋β₂-微球蛋白抗體，與步驟（2）中微粒分散液混合，于室溫反應2-4小時；

（4）將步驟（3）所得反應液18000rpm離心30min后，用Tris緩沖液重懸微粒，室溫封閉反應1-3小時；

（5）將步驟（4）所得反應液離心，棄上清液，用Tris緩沖液清洗膠乳3次，最后用R2試劑保存液重懸膠乳沉淀并稀釋至1%，超聲充分分散后即獲得包被β₂-微球蛋白抗體的乳膠顆粒。

7.按照權利要求1-5任何一項的檢測試劑盒，其特征在于：試劑R1的pH值范圍為6.5-8.5。

8. 按照權利要求1-5任何一項的檢測試劑盒，其特征在于：其在使用時，檢測主波長為540nm，副波長為700nm，測定方法采用終點法：270μl試劑R1加入3μl樣本，于37℃溫育5min后加入30μl試劑R2 10s后即開始讀數，3min后再次讀數，然后計算吸光度算差值。