[發(fā)明專利]一種檢測魚腥草黃酮類成分含量的HPLC方法

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• 申請日: 2017-11-15
• 公開（公告）號: CN107860848A
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發(fā)明（設計）人: 李敏;周娟;張思荻;卿艷;楊超
• 申請（專利權）人: 成都中醫(yī)藥大學;四川省食品藥品檢驗檢測院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙)51222
• 代理人: 李高峽,張娟

技術領域

本發(fā)明涉及中藥材質(zhì)量控制技術領域，具體涉及一種魚腥草黃酮類成分含量的HPLC測定方法。

背景技術

魚腥草為三白草科蕺菜屬植物蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)的新鮮全草或干燥地上部分。具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋等功效，用于痰熱喘咳、熱淋、熱痢、癰腫等癥。是國家衛(wèi)生部正式批準的“既是食品，又是藥品”的大宗中藥材之一。

魚腥草的有效成分主要是揮發(fā)油和黃酮類物質(zhì)。現(xiàn)代藥理研究表明，魚腥草中黃酮類化合物具有抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗誘變和消除自由基等功能。

目前生產(chǎn)的制劑中除魚腥草注射液的主要活性物質(zhì)為揮發(fā)油外，大部分制劑的主要活性成分為黃酮類化合物。目前魚腥草的質(zhì)量控制研究主要集中在揮發(fā)性成分，黃酮類成分研究較少，并且魚腥草的揮發(fā)油成分不穩(wěn)定，易氧化聚合失效，在干制或不當提取過程中，其有效成分會發(fā)生較大的變化，直接影響到藥物的療效。由此可知，現(xiàn)有魚腥草的質(zhì)量控制指標可靠性不高。

因此，急需一種能夠更好地控制魚腥草藥材質(zhì)量的方法。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種檢測魚腥草黃酮類成分含量的HPLC方法，包括以下步驟：

(1)供試品溶液制備：取魚腥草粉末，用低級醇提取，過濾得供試品溶液；

(2)對照品溶液制備：取金絲桃苷和槲皮苷對照品，混合，加低級醇配置成混合對照品溶液；

(3)分別將供試品溶液和對照品溶液注入高效液相色譜儀檢測，色譜條件如下：

色譜柱：C18色譜柱；

流動相：流動相A為乙腈，流動相B為0.1％磷酸水溶液；

梯度洗脫程序：等度洗脫30min，A與B的體積比為18～22：82～78；

檢測波長：205nm；

(4)根據(jù)檢測結果計算得到魚腥草中金絲桃苷和槲皮苷的含量。

進一步地，所述低級醇為甲醇、乙醇、丙醇；優(yōu)選甲醇。

進一步地，所述甲醇的濃度為30-70％V/V；優(yōu)選50％V/V。

進一步地，步驟(1)中，所述提取是超聲或回流提取。

進一步地，所述提取的時間為30min。

進一步地，步驟(1)中，所述魚腥草與甲醇的質(zhì)量體積比為1:100～200。

進一步地，所述魚腥草與甲醇的質(zhì)量體積比為1:150。

進一步地，步驟(3)中，所述色譜柱為Waters SunfireC18柱4.6×250mm，5μm。

進一步地，步驟(3)中，所述A與B的體積比為18:82。

進一步地，所述色譜條件的柱溫為25～40℃，流速為1.0mL/min。

本發(fā)明通過提取方法和色譜條件的篩選，成功建立了測定魚腥草中金絲桃苷和槲皮苷含量的HPLC檢測方法，該方法準確可靠，簡便快速，為提高魚腥草質(zhì)量控制水平奠定了基礎。

顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。

附圖說明

圖1為魚腥草樣品溶液的HPLC色譜圖，峰a為金絲桃苷。峰b為槲皮苷。

圖2為對照品溶液的HPLC色譜圖，峰a為金絲桃苷。峰b為槲皮苷。

圖3為流動相乙腈-0.1％磷酸水體積比為22:78時候的HPLC色譜圖。

圖4為流動相乙腈-0.1％磷酸水體積比為20:80時候的HPLC色譜圖。

圖5為流動相乙腈-0.1％磷酸水體積比為18:82時候的HPLC色譜圖。

具體實施方式

儀器與試藥

金絲桃苷(中國檢定研究院，批號：MUST-16102605)、槲皮苷(中國檢定研究院，批號：111538-201606)。

高效液相色譜儀：Waters SunfireC18柱(4.6mm×250mm，5μm)。

甲醇、磷酸均為國產(chǎn)分析純；HPLC用甲醇、乙腈均為色譜純；水為超純水。

20批魚腥草樣品的來源如下表

實施例1、本發(fā)明檢測方法

1、檢測方法