[發明專利]一種對CdTeQDs及其降解或代謝產物同時定量檢測的方法及其應用

有效

• 申請號: 201711114330.3
• 申請日: 2017-11-13
• 公開（公告）號: CN107907583B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 黃沛力;孟佩俊
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: G01N27/626
• 分類號: G01N27/626;G01N27/447;G01N1/40
• 代理公司: 鄭州先風知識產權代理有限公司 41127
• 代理人: 王俊紅

1.一種對CdTe QDs及其降解或代謝產物同時定量檢測的方法，其特征在于，

（1）取純化后的L-GSH/L-cysteine-capped CdTe QDs溶解于樣品緩沖液中，再加入人血清白蛋白（HSA），即得待測樣品；以10～40mmol·L^-1，pH=9.0的磷酸鹽緩沖液為電泳緩沖液、以10～40mmol·L^-1，pH=9.0的硼酸鹽緩沖液為樣品緩沖液，采用毛細管電泳與電感耦合等離子體質譜（CE-ICP-MS）聯用技術對待測樣品中的目標物進行分離和定量檢測；磷酸鹽緩沖液的組成為：包括Na₂HPO₄和NaH₂PO₄，硼酸鹽緩沖液的組成為：包括Na₂B₄O₇和H₃BO₃；毛細管電泳分析儀的工作條件為：未涂層熔融石英毛細管：i.d.75μm；o.d.360μm；length100cm；檢測波長：214nm；進樣壓力：35mbar；進樣時間：5s；分離電壓：16kV；分離溫度：25℃；預運行程序：1.0N NaOH，180s→H₂O，180s→電泳緩沖液，300s；鞘液類型：1ppm In內標水溶液；鞘液流速：0.5ml/min；分流比：1:100；

（2）繪制標準曲線，對不同濃度的Cd²⁺和TeO₃^2-混合標準溶液，加入樣品緩沖液和HSA，按照上述步驟（1）同樣的條件進行CE-ICP-MS分離分析，獲得分離圖譜；其中Cd²⁺分裂為Cd²⁺[1]和Cd²⁺[2]兩個峰，Cd²⁺[1]峰為HSA-Cd²⁺復合物峰，保留時間較短，待測樣品分析時，Cd²⁺[1]峰與CdTe QDs峰發生重疊；Cd²⁺[2]峰為自由Cd²⁺峰，保留時間較長，待測樣品分析時，Cd²⁺[2] 峰與CdTe QDs峰和TeO₃^2-峰能實現完全分離；改變混合標準溶液中Cd²⁺濃度，HSA濃度保持不變，在同樣的條件下進行CE-ICP-MS分離分析，不同濃度混合標準溶液的分離圖譜中Cd²⁺[1]峰與Cd²⁺[2]峰的峰面積比值保持不變，可以利用Cd²⁺[2]信號對待測樣品中的Cd²⁺[1]信號進行定量；

① Te標準曲線，將不同濃度的混合標準溶液分離圖譜中TeO₃^2-濃度與對應的TeO₃^2-峰面積進行線性擬合，繪制出TeO₃^2-峰面積與Te濃度之間的標準曲線，得出TeO₃^2-峰面積與Te濃度之間的關系式1；

② Cd標準曲線，將不同濃度的混合標準溶液分離圖譜中Cd²⁺[1]和Cd²⁺[2]的總峰面積與對應的Cd²⁺濃度進行線性擬合，繪制出Cd²⁺[1]和Cd²⁺[2]的總峰面積與Cd濃度之間的標準曲線，得出Cd²⁺[1]和Cd²⁺[2]的總峰面積與Cd濃度之間的關系式2；其中，將遷移時間較短的Cd²⁺峰稱為Cd²⁺[1]，將遷移時間較長的Cd²⁺峰稱為Cd²⁺[2]；

③將混合標準溶液分離圖譜中Cd²⁺[1]的峰面積與對應的Cd濃度進行線性擬合，繪制出Cd²⁺[1]的峰面積與對應的Cd濃度之間的標準曲線，得出Cd²⁺[1]的峰面積與Cd濃度之間的關系式3；

④將Cd²⁺[2]的峰面積與對應的Cd濃度進行線性擬合，繪制出Cd²⁺[2]的峰面積與Cd濃度之間的標準曲線，得出Cd²⁺[2]的峰面積與對應的Cd濃度之間的關系式4；

（3）定量計算

①將待測樣品分離圖譜中的TeO₃^2-的峰面積代入上述關系式1中，即可直接計算出待測樣品中CdTe QDs降解和代謝產物中的TeO₃^2-的濃度；將待測樣品分離圖譜中CdTe QDs中Te的峰面積代入上述關系式1中，即得CdTe QDs中Te的濃度；

②將待測樣品分離圖譜中Cd²⁺[2]的峰面積代入上述關系式4，即得CdTe QDs降解或代謝產生的總的Cd²⁺濃度；由待測樣品分離圖譜中Cd²⁺[2]的峰面積計算出HSA-Cd²⁺復合物中的Cd²⁺峰面積，即Cd²⁺[1]峰面積，代入上述關系式3中，即得HSA-Cd²⁺復合物中Cd²⁺的濃度；由CdTe QDs峰處的Cd峰面積減去Cd²⁺[1]峰面積，即為CdTe QDs中Cd的峰面積，然后用CdTeQDs-Cd的峰面積代入上述關系式2，即得CdTeQDs中Cd的濃度。