[發明專利]輕度貧血男性生精障礙致病基因NFATC1及其檢測方法

有效

• 申請號: 201711112876.5
• 申請日: 2017-11-13
• 公開（公告）號: CN107619862B
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發明（設計）人: 黃志玲
• 申請（專利權）人: 黃志玲
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了輕度貧血男性生精障礙致病基因NFATC1的突變形式，其序列如SEQ ID NO:1所示。本發明還提供了輕度貧血男性生精障礙致病基因NFATC1的檢測方法，該檢測方法是基于NFATC1致病基因片段的擴增和其Sanger測序，主要涉及SEQ ID NO:2?SEQ ID NO:3序列所示擴增引物對。本發明提供的NFATC1致病基因形式尚未被報道，其可以為輕度貧血男性生精障礙致病機理的解析、致病基因檢測以及針對性預防和治療等提供依據和奠定基礎；所構建的NFATC1致病基因檢測方法具有準確可靠和簡便快捷的特點。

技術領域

本發明涉及基因及其檢測方法，特別涉及輕度貧血男性生精障礙致病基因NFATC1及其檢測方法。

背景技術

在生育年齡的男性中約有5%存在不育問題，其中的40％屬于精子質量異常，主要表現為少精癥、無精癥和精子活力差等生精障礙。男性生育能力依賴于有功能的精子，精子在睪丸內產生和發育的過程是由眾多相關基因控制，這些基因發生異常就會影響精子的形成從而造成男性不育。目前認為生精相關基因的突變、插入/缺失和遺傳多態性是男性生精障礙的重要遺傳病因，然而其中大部分生精相關基因尚未得到解析。因此探究男性生精障礙致病基因特征十分有必要，這是揭示男性不育遺傳機制、致病基因檢測以及針對性預防和治療的基礎。近年來，隨著二代測序技術的發展和測序成本的降低，可以實現在基因組層面上對疾病致病基因的研究。然而由于疾病往往存在復雜性，因此必須將二代測序結果和基本體征以及臨床信息相結合從特定的疾病亞群入手更好地解析其致病基因特征。

本發明申請人從25例生精障礙患者樣本的全外顯子組測序結果中發現，有4例患者都出現了NFATC1基因的c.19839CG突變，而同時此4例患者均為輕度貧血體征。經進一步驗證，本發明申請人首次揭示了基因NFATC1為輕度貧血男性生精障礙相關基因并提供了其致病突變形式，在此基礎上構建了基于PCR擴增和Sanger測序的突變檢測方法。

發明內容

本發明提供了輕度貧血男性生精障礙亞群對應的致病基因，并在此基礎上構建了致病基因的檢測方法。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案如下：

本發明的目的之一在于提供輕度貧血男性生精障礙致病基因NFATC1，突變所在片段序列如SEQ ID NO:1所示，對應的突變為c.19839CG，發生在Exon2中；所述突變基因形式經驗證，為輕度貧血男性生精障礙致病基因。值得注意的是，SEQ ID NO:1僅展現出突變所在的片段序列，基因的其余序列詳見GeneBank上登錄號NG_029226.1的野生型參考基因序列，c.19839CG表示的是NFATC1基因的19839位點的C突變成G。

其中，所述輕度貧血男性生精障礙致病基因的揭示，可以但不限于用于制備輕度貧血男性生精障礙診斷芯片和試劑盒、構建輕度貧血男性生精障礙檢測方法以及制備輕度貧血男性生精障礙治療藥物。

本發明的另一目的在于提供輕度貧血男性生精障礙致病基因突變檢測方法，主要是利用SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:3所示引物對擴增NFATC1致病基因片段，并對擴增產物進行Sanger測序以判斷是否發生c.19839CG突變。

其中，SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:3所示引物對擴增的是c.19839CG突變所在的基因片段，擴增片段對應于GeneBank上登錄號NG_029226.1的野生型參考基因序列的19711-20087，擴增片段長度為377bp。致病基因NFATC1片段的擴增引物對SEQ ID NO:2-SEQ IDNO:3可應用于制備輕度貧血男性生精障礙診斷芯片和試劑盒以及構建男性生精障礙檢測方法中。

本發明提供了NFATC1基因引起的輕度貧血男性生精障礙的c.19839CG突變基因形式，以及基于PCR擴增和Sanger測序的致病基因檢測方法，這些可以為其致病機理的解析、致病基因檢測以及針對性預防和治療等提供依據和奠定基礎。