[發明專利]一種萬代蘭的組培快繁方法

在審

• 申請號: 201711111986.X
• 申請日: 2017-11-13
• 公開（公告）號: CN107691223A
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發明（設計）人: 秦素梅
• 申請（專利權）人: 秦素梅
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南寧新途專利代理事務所(普通合伙)45119
• 代理人: 但玉梅

1.一種萬代蘭的組培快繁方法，包括外植體的消毒、誘導培養、繼代培養及壯苗培養，其特征在于具體步驟為：

(1)外植體的消毒：采集萬代蘭的莖尖作為外植體，外植體長2cm-4cm，首先用流水沖洗，再用體積濃度為75％的酒精浸泡1min后剝去表面部分葉片，接著在植物消毒液中浸泡8min-15min后繼續剝去部分葉片，隨后在所述植物消毒液中繼續浸泡5-10min，用無菌水沖洗2-4次，最后移入超凈工作臺內，在解剖鏡下剝去剩下的葉片，露出生長點，用解剖刀切取2-5mm大小的莖尖分生組織；所述植物消毒液由以下重量份的原料制成：乙酰紫草素0.05-0.08份，蘆薈汁5-8份，黃滕提取物0.3-0.5份，吐溫-603-5份，水95-100份；

(2)誘導培養：將所述莖尖分生組織接種在誘導培養基內，在溫度為25±1℃，光照為2000LX，每天光照10-14h的條件下培養55-60天，得萬代蘭原球莖；所述誘導培養基的組成為：1/2MS+胺鮮酯1mg/L-2mg/L+辣木葉汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞葉汁3.0g/L-5.0g/L；

(3)繼代培養：將步驟(2)中生長得到的萬代蘭原球莖轉接入繼代培養基內，在溫度為25±1℃，光照為2000LX，每天光照10-14h的條件下培養，隨著原球莖的生長不斷更換培養基，繼代培養75-85天后，得到長根長葉的萬代蘭幼株；

(4)壯苗培養：將萬代蘭幼株轉接到壯苗培養基中，培養至根數為3-5條，葉片3-4片，苗高4-8cm，即得到可以移栽的萬代蘭幼苗。

2.根據權利要求1所述的萬代蘭的組培快繁方法，其特征在于：所述繼代培養基的組成為MS+萘乙酸2mg/L-3mg/L+硝酸銀1-2mg/L+瓊脂5.0g/L-8.0g/L+辣木葉汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞葉汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。

3.根據權利要求1所述的萬代蘭的組培快繁方法，其特征在于：所述壯苗培養基的組成為:1/3MS+活性炭1g/L+吲哚丁酸0.8mg/L-1.0mg/L+硝酸銀1-2mg/L+瓊脂5.0g/L-8.0g/L+辣木葉汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞葉汁4.0g/L-6.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。

4.根據權利要求1所述的萬代蘭的組培快繁方法，其特征在于：所述黃滕提取物通過以下方法提取得到，將新鮮黃滕搗碎成漿，用體積濃度為70％-75％的乙醇回流提取2-6次，乙醇與所述黃滕的液料比為5-8：1；合并濾液，濃縮、干燥得黃滕醇提物；以乙醚∶正丁醇體積比為5-8：1的混合液為提取劑，向所述黃滕醇提物中加入提取劑，提取2-5次，合并提取液，回收所述提取劑得到黃滕抑菌成分提取物。

5.根據權利要求1所述的萬代蘭的組培快繁方法，其特征在于：所述辣木葉汁和枸杞葉汁的制備方法是：先洗凈葉片然后充分搗碎，再用紗布過濾，所述濾液即為相應的汁。

6.根據權利要求1所述的萬代蘭的組培快繁方法，其特征在于：所述蘆薈汁是將蘆薈除去表皮后，用機器攪打成汁得到的。