[發(fā)明專利]三葉青綜合提取物在制備防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用

在審

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• 申請日: 2017-11-11
• 公開（公告）號: CN107929440A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹崗;吳鑫;壽旗揚(yáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: A61K36/87
• 分類號: A61K36/87;A61P19/02;A61K125/00
• 代理公司: 嘉興永航專利代理事務(wù)所(普通合伙)33265
• 代理人: 侯蘭玉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及三葉青提取物在制備防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

三葉青別稱三葉崖爬藤、蛇附子、石老鼠等，為葡萄科崖爬藤屬草質(zhì)藤本植物，全草均可入藥，以地下塊根和果實(shí)的藥用效果最好。三葉青具有“清熱解毒、抗炎鎮(zhèn)痛、活血化瘀”功效。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以慢性、進(jìn)行性、侵襲性關(guān)節(jié)炎為特征的全身性自身免疫病。我國RA患病率為0.3％～0.5％，是造成我國人群喪失勞動力和致殘的主要疾病之一，對個(gè)人和國家造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，探索其發(fā)病機(jī)理及安全、有效的治療手段是亟待解決的問題。

中醫(yī)對病因的認(rèn)識是從直接觀察和審證求因二種得來的。根據(jù)本病活動期多表現(xiàn)為手足關(guān)節(jié)腫脹疼痛、拒按、觸之發(fā)熱、晨僵、或有皮下結(jié)節(jié)，或口渴、咽痛、按赤等，舌質(zhì)紅暗、或紫、有瘀斑、瘀點(diǎn)，脈弦紉或澀數(shù)。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎活動期主要病因病機(jī)為感受風(fēng)熱、熱毒之邪，或風(fēng)寒濕入侵機(jī)體，郁久化熱為毒，導(dǎo)致氣血壅滯不通，痹阻脈絡(luò)，在辨熱毒瘀血痹阻時(shí)，最主要的表現(xiàn)為手足關(guān)節(jié)腫脹疼痛，觸之發(fā)熱及舌脈變化。臨床上有的活動性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者在熱毒瘀血之象中還表現(xiàn)關(guān)節(jié)怕冷等癥，此為陽氣內(nèi)郁所致。因關(guān)節(jié)為氣血敷布薄弱之處，熱毒痰血痹阻，陽氣內(nèi)郁不達(dá)關(guān)節(jié)，故出現(xiàn)關(guān)節(jié)怕冷等癥。此時(shí)不要誤認(rèn)為是寒證。只要熱毒得祛，氣血流通，則關(guān)節(jié)怕冷之癥可除。

許多情況下，中醫(yī)藥可達(dá)到與西藥相近的治療效果，且可彌補(bǔ)西藥較大毒副作用及停藥后復(fù)發(fā)的不足。這正是中醫(yī)藥的優(yōu)勢所在，但中醫(yī)對RA治療藥物的作用機(jī)理研究相對薄弱，因此如果在這方面的研究取得進(jìn)展，將會揭示中藥作用的較確切的作用機(jī)制，為中醫(yī)中藥治療RA提供理論基礎(chǔ)。由于中藥成分的復(fù)雜性，作用機(jī)制難以明確，療效難以控制，限制了其在臨床上的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了三葉青綜合提取物的醫(yī)藥新用途，即三葉青綜合提取物在制備防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用。

一種三葉青綜合提取物在制備防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明從三葉青中提取得到三葉青綜合提取物，經(jīng)動物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，可有效減輕CIA小鼠的足腫脹度，顯著抑制CIA小鼠關(guān)節(jié)病變并表現(xiàn)出良好的治療效果，從基因表達(dá)方面三葉青綜合提取物可以抑制 RORγt和RANKLmRNA基因的表達(dá)，從而防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

作為優(yōu)選，所述的三葉青綜合提取物的制備方法如下：

取三葉青干燥塊莖，打碎；取5000g三葉青，加入5-8倍重量質(zhì)量濃度為60％-80％的乙醇溶液，浸泡1-2h，然后加熱回流提取2-3次，每次2-3h，合并提取液，低溫真空回收酒精，得到濃縮液；

濃縮液用3-8L石油醚分3次萃取，將得到的石油醚層和水層分離，石油醚萃取液回收石油醚后得到石油醚提取液；分離的水層用3-8升乙酸乙酯分3次萃取，將乙酸乙酯層和得到的水層分離，乙酸乙酯萃取液回收乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯提取液；水層用2-6L正丁醇分3次萃取，將正丁醇層和水層分離，得到水層提取液和正丁醇萃取液，正丁醇萃取液回收正丁醇，得到正丁醇提取液，將石油醚提取液、乙酸乙酯提取液、正丁醇提取液和水層提取液混合，冷凍干燥，得到三葉青綜合提取物(SYQ)。

作為優(yōu)選，低溫真空的條件是真空度-0.085MPa，溫度40℃。

本發(fā)明為三葉青綜合提取物提供了一種新用途，也為防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎提供了一種新的藥物來源。而且三葉青提取物制備方法簡單，原料來源廣泛，具有良好的開發(fā)前景。

附圖說明

圖1是RA小鼠后足厚度隨給藥時(shí)間變化曲線；

圖2是RA小鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評分隨給藥時(shí)間變化曲線；

圖3是RA小鼠踝關(guān)節(jié)組織切片圖；

圖4是三葉青綜合提取物對RA小鼠血清中OPG含量影響比較圖；

圖5是三葉青綜合提取物對RA小鼠血清中IL-17含量影響比較圖；

圖6是三葉青綜合提取物對RA小鼠臟免疫細(xì)胞中IL-17和Th17(ROR-γt)mRNA表達(dá)影響對比圖；

圖7是三葉青綜合提取物對RA小鼠股骨頭中OPG、RANKL mRNA表達(dá)影響對比圖。

具體實(shí)施方式

下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說明。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的實(shí)施并不局限于下面的實(shí)施例，對本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā)明保護(hù)范圍。