[發明專利]蝦虹彩病毒(SIV)的RAA恒溫熒光檢測方法及試劑

有效

• 申請號: 201711107946.8
• 申請日: 2017-11-10
• 公開（公告）號: CN107988428B
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 程奇;錢冬;黃震巨;張建勛;肖文;余國君;陶智勇;徐錦余;霍勝楠;沈泓;鄭曉葉;鄭天倫;沈偉良;呂文浩
• 申請（專利權）人: 杭州眾測生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93
• 代理公司: 杭州天昊專利代理事務所(特殊普通合伙) 33283
• 代理人: 向慶寧

1.一種蝦虹彩病毒核酸的檢測試劑盒，該試劑盒由下列組成：蝦虹彩病毒正向引物、反向引物以及特異性熒光探針，其中所述蝦虹彩病毒正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示、所述蝦虹彩病毒反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述特異性熒光探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.3，其5’端標記有熒光報告基團，3’端標記有熒光淬滅基團；ABuffer、BBuffer、RAA干粉試劑、蝦虹彩病毒標準品和ddH₂O；所述A Buffer為20% PEG ；B Buffer為280mMMgAc；所述的RAA干粉試劑的成分如下：1mmol/LdNTP、90ng/μL SSB蛋白、120ng/μLrecA重組酶蛋白或30ng/μL Rad51、30ng/μL Bsu DNA聚合酶，100mmol/L Tricine、20%PEG、5mmol/L 二硫蘇糖醇、100ng/μL肌酸激酶、Exo核酸外切酶；蝦虹彩病毒標準品為含有蝦虹彩病毒保守區基因部分序列的陽性質粒；所述含有蝦虹彩病毒保守區基因部分序列的陽性質粒的序列如SEQ ID NO.4所示。

2.以非疾病診斷為目的的蝦虹彩病毒的RAA恒溫熒光檢測方法，提取待測樣品的DNA，以待測樣品的DNA為模板，利用權利要求1提供的檢測試劑盒，在蝦虹彩病毒的正向引物、反向引物、特異性熒光探針及RAA干粉試劑、A Buffer、B Buffer和ddH₂O存在下進行實時熒光RAA反應，根據實時熒光RAA擴增曲線分析待測樣品；其中所述蝦虹彩病毒正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1 所示、所述蝦虹彩病毒反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2 所示，所述特異性熒光探針的核苷酸序列如SEQ ID No.3，其5’端標記有熒光報告基團，3’端標記有熒光淬滅基團。