[發明專利]血糖測試的方法及生物傳感器

在審

• 申請號: 201711105213.0
• 申請日: 2017-11-10
• 公開（公告）號: CN109781989A
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 劉峻
• 申請（專利權）人: 上海瀚聯醫療技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/66
• 分類號: G01N33/66;G01N27/327
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種血糖測試的方法，包括以下步驟：(1)在固體基態物質上固定能與轉錄因子特異性結合的核酸序列，加入樣品，形成復合物；(2)在載體上固定轉錄因子的抗體和蔗糖轉化酶等步驟，并用血糖儀來進行檢測，血糖儀包括芯片底板、PH值檢測傳感器、過氧化氫檢測傳感器、氧檢測傳感器、氧信號輸出觸點、過氧化氫信號輸出觸點和PH值檢測信號輸出觸點。

技術領域

本發明涉及一種生物檢測領域。

背景技術

轉錄因子是一類DNA結合蛋白，能夠與特異的DNA序列結合，在基因表達調控中發揮著重要作用，它們與腫瘤發生、基因修復、細胞分化與凋亡密切相關。傳統的方法用于DNA結合蛋白的檢測主要有：凝膠遷移滯留法(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)、酶聯免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)、DNA足跡法(DNAfootprinting)以及蛋白印跡法(Western blotting)。但是，這些方法操作比較麻煩，費時耗力，不利于轉錄因子的快速檢測。近年來，各類新型的傳感器用于轉錄因子的檢測不斷出現，其檢測原理是基于轉錄因子與特異的核酸序列結合，從而導致一系列的可檢測信號的變化，主要有熒光法、比色法、電化學法、電化學發光法以及拉曼散射法等(A.J.Bonham,K.Hsieh,B.S.Ferguson,A.Vallee-Belisle,F.Ricci,H.T.Soh and K.W.Plaxco,J.Am.Chem.Soc.,2012,134,3346-3348)。雖然與傳統的方法相比，這些新技術操作方便，檢測靈敏度高，但是它們都需要用到實驗室特定的儀器，需要專業的技術人員，而且儀器價格昂貴，難以推廣到普通人群應用。試紙條生物傳感器也有報道用于轉錄因子的檢測，但是只能提供定性分析，難以滿足實際定量的需求，因而限制了它的實際應用Z.Fang,C.Ge,W.Zhang,P.Lie and L.Zeng,Biosens.Bioelectron.,2011,27,192-196

血糖檢測從有創到微創的發展過程，也是血漿糖測定到毛細血管全血糖測定的發展，目前大多使用葡萄糖生物傳感器來檢測血糖濃度，按工作原理可分為電化學型、壓電型、熱電型、光學型等，其中電化學型是血糖檢測的主流。大多數上市的血糖儀都是電化學型的測電流葡萄糖傳感器。1962年，Clark就提出了葡萄糖生物傳感器的原理，他們預示用一薄層葡萄糖氧化酶(GOD)覆蓋在氧電極表面，通過氧電極檢測溶液中溶解氧的消耗量可以間接測定葡萄糖的含量。1968年Updike和Hikcs根據此原理成功地制成了第一支葡萄糖生物傳感器。從此以后，基于酶電極的電流型生物傳感器得到了迅速的發展。

葡萄糖氧化酶電極的結構根據生物電化學原理設計的便攜式血糖儀是采用一次性使用的葡萄糖氧化酶印刷電極(即血糖試條)作為傳感器，將被測血樣滴在試條上，電極上的氧化酶促使血樣中的葡萄糖與氧發生氧化還原反應，相關化學反應式為：葡萄糖+O₂+H₂O葡萄糖酸+H₂O₂該反應所產生的電子被導電介質轉移給電極，電極在恒定的工作電壓(0.5V)作用下便產生電流。經過一段時間后，酶電極的電流值的大小與血樣中葡萄糖濃度呈一定的線性關系，通過檢測電流變化與葡萄糖濃度的這個線性關系達到檢測血糖濃度的目的。簡單地說就是“施加一定電壓于經酶反應后的血液產生的電流會隨著血液中的血糖濃度的增加而增加。通過精確測量出這些微弱電流，并根據電流值和血糖濃度的關系，反算出相應的濃度。

下面就從血糖儀的工作原理方面對其進行介紹。