[發明專利]一種腐敗希瓦氏菌噬菌體及其應用

有效

• 申請號: 201711097369.9
• 申請日: 2017-11-09
• 公開（公告）號: CN107828742B
• 公開（公告）日: 2019-09-17
• 發明（設計）人: 楊振泉;陶曉雅;張輝;高璐;饒勝其
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A23B4/22
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

本發明屬于生物工程領域，涉及一種腐敗希瓦氏菌噬菌體分離株及其應用。所述腐敗希瓦氏菌噬菌體分離株是腐敗希瓦氏菌噬菌體(Shewanella putrefaciens phage)SppYZU05，其保藏編號：CCTCC NO：M 2016717。本發明還公開了腐敗希瓦氏菌噬菌體SppYZU05作為抑菌劑的應用。

技術領域

本發明涉及一種腐敗希瓦氏菌噬菌體分離株，及其抑菌應用。屬于生物工程領域。

背景技術

腐敗希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)是水產品、肉制品等高水分蛋白食品冷鏈流通中的特定腐敗菌，在低溫貯藏(0-8℃)條件下生長快，腐敗能力強，最終形成腐敗過程中的優勢菌群，并產生H₂S、還原TMAO，導致肉質變粘，肉色改變等感官品質的劣變，給水產及肉品加工業造成嚴重的經濟損失。有效抑制這類細菌的生長及加工與貯藏過程中的交叉污染，是維持低溫水產品及肉制品鮮度，延長貨架期的重要手段。目前用于控制食品中腐敗細菌生長的常規保鮮劑主要有化學防腐劑，近年來出于對食品安全和綠色保鮮的需求，人們利用從動植物、微生物中提取的天然成分作為生物抑菌劑，如大蒜素、茶多酚、溶菌酶、乳酸鏈球菌素等。這些抑菌劑雖能抑制腐敗希瓦氏菌生長，往往低溫保鮮效果不佳、制備成本高。此外，腐敗希瓦氏菌在生長過程中，極易在食品、加工器具的表面形成生物被膜，被膜內的細菌對常規保鮮劑、抑菌劑的抵抗能力可以提高數百倍，很難被清除，從而導致持續性污染，給水產品和肉制品加工和保鮮帶來嚴重危害。因此亟需開發新型生物保鮮劑應用于水產和肉制品加工與貯藏。

噬菌體是一類細菌依賴性的病毒，又稱細菌病毒。裂解性噬菌體感染細菌后，可在宿主菌內快速增殖，并使之裂解，故又稱毒性噬菌體。噬菌體廣泛存在于自然界中，并且對宿主菌具有專一性，制備成本低廉，安全性好。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種對腐敗希瓦氏菌具有強裂解作用的噬菌體制劑，該制劑可以單獨或復配使用，能夠有效控制生物被膜形成、抑制腐敗希瓦氏菌生長與代謝。

本發明所述的一種腐敗希瓦氏菌噬菌體(Shewanella putrefaciens phage)SppYZU05，其保藏編號：CCTCC NO：M 2016717。

本發明進一步公開了腐敗希瓦氏菌噬菌體(Shewanella putrefaciens phage)SppYZU05在制備抑菌劑中的應用。

本發明還提供了一種腐敗希瓦氏菌抑菌劑，是以所述的噬菌體SppYZU05分離物或培養物作為抑菌成分。

本發明從農貿市場采集的污水樣品中分離出一株腐敗希瓦氏菌噬菌體SppYZU05(Shewanella putrefaciens phage SppYZU05)，保藏在中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC)，保藏地址：武漢武漢大學；保藏編號：CCTCC NO：M 2016717；保藏日期：2016年12月2日。

本發明中的腐敗希瓦氏菌噬菌體SppYZU05具有以下生物學特征：

(1)形態學特征：通過透射電鏡觀察，頭部對稱，直徑約為61nm，尾長約為166nm，無伸縮性尾鞘，噬菌體的形態學特征歸于長尾噬菌體科。

(2)噬菌體核酸類型：噬菌體為dsDNA。

(3)噬菌體基因組特征：SppYZU05基因組全長為54319bp，其中編碼基因總長度分別為48786bp，平均長度分別為707bp，占總長的89.81％，GC含量為50.63％，有69個開放閱讀框(ORFs)。69個ORFs編碼蛋白中有12個ORFs在數據庫中搜不到同源性基因，57個ORFs編碼的蛋白在數據庫中找到同源性序列，其中44個ORFs編碼的蛋白為假設蛋白，有13個蛋白序列功能明確，基因組數據顯示SppYZU05為一種新的噬菌體。

(4)具有強烈的腐敗希瓦氏菌裂解性能。