[發明專利]偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株及其應用

有效

• 申請號: 201711083192.7
• 申請日: 2017-11-07
• 公開（公告）號: CN107828741B
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 王繼春;宋增財;郭容利;喬永峰;王志勝;許夢微;劉婭梅;鄭亞婷;范紅杰;侯繼波
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/245;A61P31/22;C12R1/93
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 袁靜

本發明提供偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株及其應用，屬于動物醫學的疫苗領域。偽狂犬病病毒LA1206?80株，保藏編號為：CGMCC No.14329。本發明還提供偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株在制備偽狂犬病疫苗中的應用、一種重組載體活疫苗。該重組載體是在所述弱毒株基因組中插入了外源保護性抗原基因表達盒后得到的。PRV LA1206?80株的活疫苗對1日齡初生仔豬100%安全，可用于初生仔豬的早期免疫，盡早阻斷野毒的感染。接種斷奶PRV陰性仔豬后能快速產生高效保護力，尤其是該疫苗不但能阻止發病，還能阻止排毒。通過對PRV gE和gB抗體進行監測，非常有利于對PRV變異株的凈化。

技術領域

本發明屬于動物醫學的疫苗領域，具體涉及偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株及其應用。

背景技術

偽狂犬病是由偽狂犬病病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的一種急性、烈性傳染病。牛、羊等家畜和野生動物發生偽狂犬病時常表現為奇癢的典型癥狀，以及發熱和腦脊髓炎等臨床癥狀。而豬發生偽狂犬病的癥狀與年齡相關，母豬常發生流產；新生仔豬有神經癥狀，死亡率高；育肥豬主要是呼吸道癥狀，成年豬感染偽狂犬病毒后生長停滯，通常不發生死亡。由于PRV基因缺失株疫苗(如gE基因缺失的Bartha K61株等)的發明和大規模推廣使用，并配合鑒別免疫豬與野毒感染豬的PRV gE抗體的ELISA檢測方法的建立和應用，通過持續淘汰陽性種豬，世界上許多國家實現了在家養豬群中偽狂犬病病毒的凈化，在我國，許多豬場也成功建立了PRV gE抗體陰性的豬群，不少豬場基本實現了PRV的凈化，豬偽狂犬病得到了較好控制。

自2011年以來，我國北方許多免疫過傳統豬偽狂犬病疫苗的豬場大規模出現豬偽狂犬病疫情，之后疫情迅速向全國大部分養豬場蔓延，PRV gE抗體陽性率居高不下，對我國養豬業造成嚴重危害。多個團隊的研究結果證明此輪疫情是由變異的PRV野毒株引起，該變異株的致病性顯著增強，其主要抗原基因與傳統疫苗株有明顯不同，為更有效地應對PRV變異株的危害，應用變異株研制既能提高保護力，又能鑒別診斷免疫豬與野毒感染豬的新型疫苗是當前我國豬偽狂犬病防控的關鍵。但是，現有變異株活疫苗的安全性還不夠高。例如，申請號為201510388390.9的發明專利中公開了通過敲除偽狂犬病病毒野毒AH02LA株gE基因后獲得的LA-A株，采用該毒株制備的疫苗對偽狂犬病病毒變異株100％保護效果，尤其是該疫苗不但能阻止發病，還能阻止排毒，但是，該毒株僅對4周齡仔豬安全。

發明內容

本發明的目的是提供偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株，該毒株能夠很好的適應ST細胞，滴度高，毒力顯著降低，對1日齡仔豬無致病性，因此是具有較高安全性的疫苗候選弱毒株。

偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株，是偽狂犬病病毒LA1206-80株，保藏編號為：CGMCC No.14329。

本發明的另一目的是提供偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株在制備偽狂犬病疫苗中的應用，采用該疫苗免疫后能夠對免疫豬只提供100％保護，不但能阻止發病，還能阻止排毒，由于該毒株毒力顯著降低，對1日齡仔豬無致病性，因此可用于初生仔豬的早期免疫，盡早阻斷野毒的感染，該活疫苗具有較高的安全性。

本發明的再一目的是提供以偽狂犬病病毒雙基因缺失弱毒株為活性成分的疫苗。采用偽狂犬病病毒LA1206-80株的疫苗對1日齡初生仔豬安全，接種斷奶PRV陰性易感仔豬后7天即能達到對偽狂犬病病毒變異株100％保護效果，尤其是該疫苗不但能阻止發病，還能阻止排毒，在安全性和免疫效力上都取得了意想不到的技術效果。通過對抗體進行監測，可以區分免疫該疫苗的動物與感染動物，有利于對PRV變異株的凈化。