[發(fā)明專利]雙基因融合增強植物抗蚜性的方法

在審

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• 申請日: 2017-11-07
• 公開（公告）號: CN107937424A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設計）人: 唐克軒;馬嘉偉;潘琪芳;付雪晴;張婷婷;錢虹妹;趙靜雅;馬亞男;王宇婷;孫小芬
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 上海交達專利事務所31201
• 代理人: 王毓理,王錫麟

1.一種具有抗蚜蟲功能的基因，其特征在于，融合自蚜蟲的V-ATPase subunit E和COO2基因，其核苷酸序列如Seq ID No.3所示。

2.一種雙基因融合增強植物抗蚜性的方法，其特征在于，通過從桃蚜(Myzus×persicae)的V-ATPase subunit E基因、COO2基因以及V-ATPase subunit E基因和COO2基因部分序列融合片段分別構建得到具有抗蚜蟲功能的基因，通過構建表達載體并將其分別轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，以該農(nóng)桿菌侵染小麥幼胚，分別在小麥中表達產(chǎn)生V-ATPase subunit E、COO2基因以及V-ATPase subunit E和COO2雙基因的dsRNA，從而達到趨避蚜蟲的目的。

3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征是，所述的表達載體，通過構建玉米ubiquitin-1啟動子驅(qū)動V-ATPase subunit E，COO2基因以及V-ATPase subunit E基因和COO2融合基因沉默載體，即RNAi載體。

4.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征是，所述的ubiquitin-1啟動子具體為：組成型啟動子。

5.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征是，所述的侵染，即將小麥幼胚轉(zhuǎn)移至農(nóng)桿菌菌液中侵染后置于黑暗條件下的培養(yǎng)基上培養(yǎng)得到幼胚愈傷組織，進而經(jīng)抗性再生植株篩選后得到小麥抗性苗。

6.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征是，所述的抗蚜性包括：

1)在防治蚜蟲中的應用或在制備防治蚜蟲產(chǎn)品中的應用；

2)在促進蚜蟲死亡中的應用或在制備促進蚜蟲死亡產(chǎn)品中的應用；

3)在抑制蚜蟲生長中的應用或在制備抑制蚜蟲生長產(chǎn)品中的應用。

7.一種重組表達載體，即RNAi載體，其特征在于，基于dsRNA構建得到；

所述的dsRNA包括：

1)由Seq ID No.1所示的在植物中表達的核苷酸和其反向互補序列；

2)由Seq ID No.1所示的在植物中表達的核苷酸和其反向互補序列；

3)由Seq ID No.3所示的在植物中表達的核苷酸和其反向互補序列，由Seq ID No.1所示的核苷酸和Seq ID No.2所示的核苷酸組成。