[發明專利]一種常溫下基于分子信標的核酸快速檢測方法在審
| 申請號： | 201711080881.2 | 申請日： | 2017-11-06 |
| 公開（公告）號： | CN108130364A | 公開（公告）日： | 2018-06-08 |
| 發明（設計）人： | 錢程;吳堅 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12Q1/686 | 分類號： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100 | 代理人： | 梁寅春;劉曉春 |
| 地址： | 310058 浙江省杭州*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 核酸 擴增反應 快速檢測 常溫下 混合液 擴增反應體系 紫外燈光照射 定性檢測 分子信標 熒光指示 低成本 溫度法 目測 可視 探針 陰性 熒光 耗時 觀察 | ||
【權利要求書】：
1.一種常溫下基于分子信標的核酸快速檢測方法，對所述核酸作兩溫度法極速PCR擴增，其特征是在所述擴增反應體系中加入分子信標作熒光指示探針，所述擴增反應溫度變化為95℃-60℃，單個循環時間≤10s，總耗時≤10min，擴增反應結束后，直接用紫外燈光照射擴增反應后混合液，目測觀察，所述混合液發出熒光可視見的測定為陽性，否則測定為陰性。
2.一種常溫下基于分子信標的核酸快速檢測方法，對所述核酸作兩溫度法極速PCR擴增，其特征是在所述擴增反應體系中加入分子信標作熒光指示探針，所述擴增反應溫度變化為95℃-60℃，單個循環時間≤10s，總耗時≤10min，擴增反應結束后，用濾光片一過濾LED燈所得光線照射擴增反應后混合液，再用濾光片二遮擋所述混合液，目測觀察濾光片二的通光，有熒光可視見的測定為陽性，否則測定為陰性；所述第一濾光片的通光波長與所述分子信標5’所標記的熒光物質的激發波長相當，所述第二濾光片的通光波長與所述分子信標5’所標記的熒光物質的發射波長相當。
3.如權利要求1或2所述的快速檢測方法，其特征是所述體系中加入分子信標濃度為0.01-1μM。
4.如權利要求1或2所述的快速檢測方法，其特征是所述體系中加入分子信標濃度為0.05-0.5μM。
5.如權利要求1或2所述的快速檢測方法，其特征是所述體系中加入分子信標濃度為0.1-0.2μM。
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