[發明專利]一種通過內皮細胞來源的外泌體擴增神經干細胞的方法有效
| 申請號： | 201711079194.9 | 申請日： | 2017-11-06 |
| 公開（公告）號： | CN107937342B | 公開（公告）日： | 2021-07-06 |
| 發明（設計）人： | 張一哲;鄭敏化;韓驊 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第四軍醫大學 |
| 主分類號： | C12N5/0797 | 分類號： | C12N5/0797;C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 710032 陜西*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 通過 內皮 細胞 來源 外泌體 擴增 神經 干細胞 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種體外擴增神經干細胞的方法，其特征在于：
(1)將人原代臍靜脈內皮細胞在無血清條件下培養72h后，收集培養基上清液；
(2)將培養上清液離心，再經濾膜過濾及聚乙二醇6000混勻后，孵育12小時，12000g/分鐘離心1小時，從而得到外泌體；
(3)將上述人原代臍靜脈內皮細胞來源的外泌體加入小鼠神經干細胞中，濃度為10μg/ml，孵育時間為12小時，培養5天，實現體外擴增神經干細胞。
2.根據權利要求1所述方法，其特征在于：所述的人原代臍靜脈內皮細胞的外泌體加至小鼠神經干細胞后,小鼠神經干細胞的自我更新及增殖能力增強，凋亡比例減少；具體為：相對于對照組，外泌體處理組神經干細胞產生的神經克隆球數目增多；神經干細胞內的細胞增殖因子Ki67經實時定量PCR檢測后表達水平增高；神經干細胞經EdU摻入染色后陽性增殖信號比例上升；神經干細胞TUNEL染色陽性凋亡信號比例下降。
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