[發明專利]14到16度黃酒非糖固形物簡便快速測定方法

在審

• 申請號: 201711074972.5
• 申請日: 2017-11-06
• 公開（公告）號: CN107860734A
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發明（設計）人: 陳荷冰;陳如凱
• 申請（專利權）人: 陳荷冰
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及非糖固形物檢測方法，特別涉及一種14到16度黃酒非糖固形物簡便快速測定方法。

背景技術

黃酒是我國的特色酒種，其色澤明亮、香氣濃郁、甘甜味美、風味醇厚，并含有豐富的氨基酸、小分子糖類、有機酸、維生素和微量元素等。黃酒由于其營養豐富、酒精度低且具有獨特的風味口感和功效而深受廣大人民群眾的喜愛。非糖固形物是酒樣中除糖外的非揮發性組分的統稱，其在黃酒中的占比很小通常不足3%。雖然含量低，非糖固形物作用卻很大，它很大程度上決定了黃酒的色澤、滋味、營養和功效，是黃酒品質等級評定的一項重要指標。按照國標GB/T 13662-2008《黃酒》中參數，同一類型的黃酒中非糖固形物含量越高，黃酒的品質越好、口味越佳。

現行的黃酒國標中采用的是4h烘干法來測定酒樣中的非糖固形物含量，這種方法耗時長，而且存在酒樣烘干4h后質量未達到恒重的情況，不利于快速測定、精確測量和批量檢測。此外，還有基于近紅外光譜建立的酒樣非糖固形物快速測定方法，但是這種方法需要借助于貴重的設備，而且需要耗費較高的檢測成本。因此目前亟需建立準確可靠、簡便快速且經濟實用的黃酒非糖固形物測定方法。

乙醇含量即酒精度和總糖含量是黃酒的必測指標，單位體積的酒樣質量可以很容易稱定，此時若能測出酒樣中乙醇水體系的總質量，則酒樣質量減去乙醇水體系質量再減去總糖就可以得到非糖固形物質量。本發明利用特定雙鏈DNA片段在不同水和乙醇質量體積比的乙醇水體系中變性程度不同導致260nm波長下吸光度有所差異，從而建立起一種全新的14到16度黃酒中非糖固形物測定方法，具有準確可靠、簡便快速且經濟實用的特點，適合于酒廠檢測實際需求。

發明內容

本發明的目的在于提供14到16度黃酒非糖固形物簡便快速測定方法。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案為，14到16度黃酒非糖固形物簡便快速測定方法的主要步驟如下：

（1）在黃酒品質檢測中，按照現行國標先測定其酒精度v這一必測指標，同時稱定1L酒樣質量Mo，測定酒樣的溫度并據此查詢乙醇密度ρ。

（2）移取320ul室溫待測黃酒酒樣到空的酶標板中，加入40ul初始變性劑和40ul特定雙鏈DNA片段并充分混勻后靜置4min，同時設置對照孔為320ul待測酒樣加40ul初始變性劑加40ul蒸餾水，待測酒樣和對照均取平行測三次，樣本處理好后將酶標板置于酶標儀中。

（3）設定好酶標儀程序在260nm波長下測定樣品孔和對照孔中的吸光度，則樣品的平均吸光度減去對照的平均吸光度即為樣品中特定雙鏈DNA片段的實際吸光度x。將x代入關系式y=-11.349x+7.836中則可算出酒樣中水和乙醇的質量體積比y，則酒樣中總固形物含量M=Mo-10×ρ×v-10×y×v也即M=Mo-10×（ρ+y）×v，進而非糖固形物含量m=M-Mt，Mt為總糖含量。

其中，步驟（1）中所述的黃酒是指國標法測定酒精度v大于等于14.0且小于等于16.0的黃酒；所述酒精度v是黃酒品質檢測的必測指標，原本就有可直接采用；所述1L酒樣質量Mo的測定方法為：在按國標法測定酒樣酒精度時，量取100ml酒樣后稱量裝有酒樣的容量瓶重，則該重量扣除空容量瓶重即為100ml酒樣重量，經換算即可得到1L酒樣質量Mo，其單位為g/L；所述酒樣溫度為正常室溫即可，優選地，控制在30.0±5.0℃之間。

其中，步驟（2）中所述的初始變性劑是8%質量體積分數的尿素和8%體積體積分數的甲酰胺混合水溶液，即每100ml初始變性劑中含有8g的尿素和8ml的甲酰胺；所述的特定雙鏈DNA片段，其序列如SEQ ID NO：1所示，濃度為20umol。

其中，步驟（3）中所述的平均吸光度是指三個平行的吸光度的算術平均值；所述總固形物含量M=Mo-10×ρ×v-10×y×v，其中10×ρ×v即乙醇密度乘以酒精度也就是100ml酒樣的乙醇體積含量再乘以10，就可以得到1L酒樣中的乙醇質量；而10×y×v即乙醇體積乘以水和乙醇的質量體積比再乘以10，就可以得到1L酒樣中的水質量，則10×（ρ+y）×v實際上就是1L酒樣中乙醇水體系的質量之和；因此總固形物含量M=Mo-10×（ρ+y）×v，也即1L酒樣總質量減去其中的乙醇水體系質量則為1L酒樣中的總固形物含量，其單位為g/L；進而非糖固形物含量等于總固形物含量減去總糖含量也即m=M-Mt，而總糖含量Mt是黃酒品質檢測的必測指標，原本就有可直接采用，其單位為g/L。