[發明專利]一種檢測鄰苯基苯酚的免疫膠體金檢測卡及其制備方法

在審

• 申請號: 201711073707.5
• 申請日: 2017-11-05
• 公開（公告）號: CN109752534A
• 公開（公告）日: 2019-05-14
• 發明（設計）人: 洪霞;張淑雅;立雯馨
• 申請（專利權）人: 江蘇維賽科技生物發展有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/532
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明鄰苯基苯酚的免疫膠體金檢測卡及其制備方法，涉及動物源食品獸藥殘留檢測技術領域。本發明的檢測卡外殼中的試紙條，由PVC膠板、樣品墊、膠體金結合墊、包被膜和吸水墊組成；膠體金膜為含鄰苯基苯酚單克隆抗體的玻璃纖維素膜，包被膜是硝酸纖維素膜，其上設有T線和C線，T線包被有鄰苯基苯酚蛋白質偶聯物，C線包被有羊抗鼠IgG抗體。本發明有效用于快速檢測鄰苯基苯酚，方便、快捷、結果準確。

技術領域

本發明涉及谷物食品中農藥殘留檢測技術領域，特別是涉及鄰苯基苯酚的免疫膠體金檢測卡及其制備方法。

背景技術

食品安全衛生關系到人類的生命和健康，引起了國際社會的廣泛關注。隨著食品生產自然方式的減少，工業化比重的增加，食品被人們故意或非故意污染的機會正逐漸增加，而且隨著國際貿易的日益發達，食品污染擴散的速度之快、范圍之廣、危害之大，也是前所未有的。現在的果蔬保鮮貯藏技術，主要是依靠適宜的低溫和空氣調節，但在果蔬貯藏期間它們能夠承受的溫使用度和氣體條件下，控制不住霉菌的生長；另外果蔬保鮮貯藏需要的較高濕度，正式霉菌生長的良好條件，因此在果蔬保鮮中使用防腐劑是必不可少的。防腐劑不但對果蔬保鮮有利，而且它也可控制產生霉菌，從而使人們免受霉菌毒素的侵害。

防腐劑的使用對食品貯藏具有重要意義。但在食品中使用化學品難免讓人們擔心，防腐劑能殺菌，同時對人體也有害處。人們對于在食品中使用化學品，尤其是使用防腐劑很擔心，但在實際上不使用又不行，防腐劑成了一把雙刃劍。為此，有關專家提出幾點建議，其中一點要嚴格執行GB2760中規定的最高使用限量和最高殘留限量，選擇合適的劑量，最大限度地提高藥效，從而減少使用量，將污染降至最低水平。這就需要發展相應的檢測方法，快速、準確的檢測出果蔬中殘留的防腐劑，給消費者提供最大限度的博阿胡。防腐劑在實際應用時，由于微生物種類的多樣性和防腐劑作用的特點，人們致力加強復配技術的開發和應用，采用多種保鮮劑的混合應用。因此，需要發展同時測定果蔬中多種保鮮劑的分析方法，提高分析時間和材料方面效率。

在世界各國廣泛使用，防止水果在生長、儲存、運輸過程中腐爛變質。但水果中殘留的防腐劑對人體具有一定的毒性，主要侵害人體的肝腎、神經系統和骨髓。有文獻報道鄰苯基苯酚對試驗動物具有潛在的致膀胱癌作用。因此，需要發明一種工序少、操作簡便檢測的新方法。

發明內容

針對以上情況，本發明的目的就是為了克服現有技術存在的缺陷而提供一種鄰苯基苯酚的免疫膠體金檢測卡及其制備方法，可有效解決能快速、簡便地檢測出鄰苯基苯酚的問題。

本發明的鄰苯基苯酚膠體金檢測卡，包括包被了單克隆抗體膠體金標記物的膠體金結合墊、包被了鄰苯基苯酚-BSA和羊抗鼠IgG的硝酸纖維素膜、樣品墊、吸水墊、PVC膠板和塑料模具組成，在PVC膠板的一端依次粘附樣品墊、結合墊，中間黏貼硝酸纖維素膜，另一端粘附吸水墊。

本發明的鄰苯基苯酚膠體金檢測卡的制備方法，是由以下步驟實現：

(1)膠體金溶液制備：取1 L 三角燒瓶1個，加入超純水495 mL，而后加入1%氯金酸(HAuCl₄·3H₂O) 5 mL，配制成500 mL 0.01%氯金酸水溶液，加熱煮沸后在持續攪拌的情況下加入1%檸檬酸三鈉(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)溶液5-7 mL，繼續攪拌加熱，當溶液的顏色完全變為透明的紫紅色時，維持5 min后停止加熱，補水至原體積，冷卻至室溫，2-8℃保存備用；

(2)抗體的預處理：將要標記的鄰苯基苯酚抗體在1000 r/min, 4℃條件下，離心20min，取上清，用0.01 mol/L PBS稀釋成1 mg/mL；或者用0.01 mol/L PBS稀釋成1 mg/ml，過0.22 μm濾膜；