[發(fā)明專利]一種馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711070758.2
• 申請日: 2017-11-03
• 公開（公告）號: CN107603891A
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周曉罡;李恒;劉春菊;陶南;余萍;姚春馨;丁玉梅
• 申請（專利權(quán)）人: 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/04;C12R1/645
• 代理公司: 昆明今威專利商標(biāo)代理有限公司53115
• 代理人: 賽曉剛

1.一種馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：用無菌水作為馬鈴薯晚疫病菌的保存載體對馬鈴薯晚疫病菌進(jìn)行保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟1：將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿平板中，待培養(yǎng)基凝固后用手術(shù)刀切下一塊待保存的馬鈴薯晚疫病菌菌塊置于培養(yǎng)基中心處，使其菌絲面向上；

步驟2：用封口膜將兩個培養(yǎng)皿之間的縫隙封住；

步驟3：將培養(yǎng)皿平板置于17℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)至菌種長滿培養(yǎng)皿；

步驟4：用手術(shù)刀將馬鈴薯晚疫病菌菌塊切成小菌塊；

步驟5：用鑷子將切好的菌塊夾出放置于盛有無菌水的三角瓶中；

步驟6：用無菌透氣封口膜封住瓶口，膜上加兩層與封口膜大小一樣的報紙，將瓶口用棉線扎緊；

步驟7：在報紙上標(biāo)注菌種信息及保存日期；

步驟8：將三角瓶置于17℃的恒溫培養(yǎng)箱中保存。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：步驟1、步驟2、步驟4、步驟5、步驟6均須在無菌操作臺進(jìn)行無菌操作。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：步驟1所述培養(yǎng)基為馬鈴薯晚疫病菌固體培養(yǎng)基，其成分為：黑麥60-80g，番茄汁150mL，瓊脂粉18-20g，CaCO₃1.2g，加水至1000mL，pH7.0；

所述馬鈴薯晚疫病菌固體培養(yǎng)基，按照包括如下步驟的方法得到：將黑麥麥粒放入300mL水中，浸泡36h，保存上清液，加入100mL水于膨脹的黑麥麥粒中攪拌2min后水浴3h，4層紗布過濾，濾液與上清合并；順序加入番茄汁、CaCO₃和瓊脂，最后用水定容至1000mL；

所述水為自來水，黑麥麥粒為去殼后的黑麥麥粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：步驟1所述培養(yǎng)皿直徑為90㎜，所取的馬鈴薯晚疫病菌菌塊大小為10㎜×10㎜。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：步驟4所取的馬鈴薯晚疫病菌菌塊大小為5㎜×5㎜。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯晚疫病菌的簡單保存方法，其特征在于：步驟5所用三角瓶容量為500mL。