[發明專利]用于細胞重編程的方法和組合物

在審

• 申請號: 201711070319.1
• 申請日: 2017-11-03
• 公開（公告）號: CN108018314A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發明（設計）人: 張康;侯睿;李根
• 申請（專利權）人: 優美佳生物技術有限公司;加利福尼亞大學董事會
• 主分類號: C12N15/90
• 分類號: C12N15/90;A61K35/30;A61K35/28;A61K35/17;A61P27/02;A61P35/00;A61P7/06
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 鄭霞

1.一種將細胞從第一細胞類型重編程成第二細胞類型的方法，其包括使所述細胞接觸：

a)與基因的靶位點雜交的指導RNA，其中所述基因編碼有助于所述細胞的細胞類型特異性功能的蛋白質；以及

b)Cas核酸酶或編碼所述Cas核酸酶的多核苷酸，其中所述Cas核酸酶在所述靶位點處切割所述基因的鏈，

其中切割所述鏈改變所述基因的表達，使得所述細胞不能再執行所述細胞類型特異性功能，從而將所述細胞重編程成所述第二細胞類型。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述基因包含在所述第一細胞類型中導致不利影響的突變，其中所述不利影響選自衰老、凋亡、缺乏分化和異常細胞增殖。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述基因編碼轉錄因子。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞為胰腺、心臟、腦、眼、腸、結腸、肌肉、神經系統、前列腺或乳腺的細胞。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞為有絲分裂后的細胞。

6.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞為眼細胞。

7.如權利要求6所述的方法，其中所述眼細胞為視網膜細胞。

8.如權利要求7所述的方法，其中所述視網膜細胞為視桿。

9.如權利要求8所述的方法，其中所述細胞類型特異性功能為夜間視覺或顏色視覺。

10.如權利要求6所述的方法，其中所述基因選自NRL、NR2E3、GNAT1、RORβ、OTX2、CRX和THRB。

11.如權利要求1所述的方法，其中所述第一細胞類型為視桿并且所述第二細胞類型為視錐。

12.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞為癌細胞。

13.如權利要求12所述的方法，其中所述細胞類型特異性功能選自異常細胞增殖、轉移和腫瘤血管化。

14.如權利要求12所述的方法，其中所述第一細胞類型為結腸癌細胞，并且所述第二細胞類型為良性腸細胞或良性結腸細胞。

15.如權利要求14所述的方法，其中所述基因選自APC、MYH1、MYH2、MYH3、MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、EPCAM、POLE1、POLD1、NTHL1、BMPR1A、SMAD4、PTEN和STK11。

16.如權利要求12所述的方法，其中所述第一細胞類型為惡性B細胞，并且所述第二細胞類型為良性巨噬細胞。

17.如權利要求16所述的方法，其中所述基因選自C-MYC、CCND1、BCL2、BCL6、TP53、CDKN2A和CD19。

18.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞為神經元。

19.如權利要求18所述的方法，其中所述第一細胞類型產生選自淀粉樣蛋白β、tau蛋白及其組合的至少一種蛋白質，并且所述第二細胞類型不產生所述蛋白質，或者相比于所述第一細胞類型產生較少的所述蛋白質。

20.如權利要求18所述的方法，其中所述第一細胞類型為神經元，并且所述第二細胞類型為神經膠質細胞。

21.如權利要求18所述的方法，其中所述基因選自APP和MAPT。