[發(fā)明專利]一種電針?lè)ㄖ委熝苄园V呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711069455.9
• 申請(qǐng)日: 2017-11-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109745223A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王永紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王永紅
• 主分類號(hào): A61H39/00
• 分類號(hào): A61H39/00;A61N1/36;A61D7/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

一種電針?lè)ㄖ委熝苄园V呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的方法，采用28號(hào)25mm毫針，于模型大鼠頭部百會(huì)穴（頂骨正中）斜刺10mm，大椎穴（第７頸椎下）、脾俞穴（第12胸椎下兩旁肋間）和腎俞穴（第２腰椎下兩旁）各直刺５mm，連接電針儀，施以連續(xù)波，頻率150Hz，強(qiáng)度以大鼠安靜耐受為度（約１mA），每天電針１次，留針20min；連續(xù)治療15d。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種電針?lè)ㄖ委熝苄园V呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的方法，具體地說(shuō)是以一種電針?lè)ㄖ委熝苄园V呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的方法。

背景技術(shù)

目前公知的針灸治療血管性癡呆（vascular dementia,VD）具有多系統(tǒng)、多水平、多層次、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)。在長(zhǎng)期的臨床和科研實(shí)踐中，總結(jié)出“通督調(diào)神固本”之法，選取精而少的穴位（百會(huì)、大椎、脾俞、腎俞）治療ＶＤ，取得了肯定的臨床療效，并通過(guò)對(duì)氧自由基、腦神經(jīng)遞質(zhì)及腦細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)等的觀察加以證實(shí)。

發(fā)明內(nèi)容

材料與方法

1 動(dòng)物、分組與造模；成年雄性健康ＳＤ大鼠（ＳＰＦ級(jí)）48只，體質(zhì)量180~220g，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供〔實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)：ＳＣＸＫ（粵）2003-000１；使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào)：0010036〕。隨機(jī)抽取８只大鼠作假手術(shù)對(duì)照組，其他40只均采用改良的四血管阻斷法復(fù)制ＶＤ模型。術(shù)后7d存活并無(wú)肢體殘疾的大鼠25只，將其隨機(jī)分為電針組９只、西藥組８只和模型組８只。假手術(shù)組８只全部存活。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均按常規(guī)飼養(yǎng)。

2 主要儀器；ＳＤＱ-30雙極射頻電凝器（上海手術(shù)器械廠）；Morris水迷宮（廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）；Ｇ6805-１型治療儀（中國(guó)青島華聲儀器廠）；１次性無(wú)菌針灸針（蘇州天一針灸器械有限公司）；ＳＮ-695Ｂ型放免γ測(cè)量?jī)x（上海核儀器一廠）。

3 治療方法；電針組采用28號(hào)25mm毫針，參考《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》取穴，于模型大鼠頭部百會(huì)穴（頂骨正中）斜刺10mm，大椎穴（第７頸椎下）、脾俞穴（第12胸椎下兩旁肋間）和腎俞穴（第２腰椎下兩旁）各直刺５mm，連接電針儀，施以連續(xù)波，頻率150Hz，強(qiáng)度以大鼠安靜耐受為度（約１mA），每天電針１次，留針２０min；西藥組給予尼莫通（拜耳醫(yī)藥保健有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：110156），按12mg／kg灌胃，每日１次；模型組給予生理鹽水，按20mL/kg灌胃，每日１次。各組均連續(xù)治療15d。假手術(shù)組在同等條件下飼養(yǎng)，未予任何治療。

4 檢測(cè)方法；為學(xué)觀測(cè)治療結(jié)束后開(kāi)始水迷宮檢測(cè)。水迷宮內(nèi)水深41cm，水溫22℃~26℃。在水池壁標(biāo)明４個(gè)入水點(diǎn)，由此將水池等分為４個(gè)象限（Ｅ，Ｓ，Ｗ，Ｎ），任選一象限正中放置平臺(tái)，沒(méi)于水下１cm，水面覆蓋塑料泡沫。①定位航行試驗(yàn)：將受試大鼠按順時(shí)針?lè)较蛞来斡桑?，Ｓ，Ｗ，Ｎ４個(gè)入水點(diǎn)面向池壁放入水中。記錄２min內(nèi)尋找平臺(tái)的時(shí)間（逃避潛伏期，escape latency）。如果大鼠在２min內(nèi)找到平臺(tái)，記錄其實(shí)際逃避潛伏期；如果在２min內(nèi)未找到平臺(tái)，由試驗(yàn)者將其引上平臺(tái)并停留10s，逃避潛伏期記為２min。歷時(shí)6d，每天１次。②空間探索試驗(yàn)（spatial probetest）：定位航行試驗(yàn)結(jié)束后撤出平臺(tái)，然后任選一相同入水點(diǎn)將大鼠放入水中，測(cè)其２min內(nèi)跨原平臺(tái)及其他３個(gè)象限相應(yīng)平臺(tái)位置的次數(shù)。血漿ＥＴ含量測(cè)定各組大鼠于水迷宮檢測(cè)后取樣，眼眶采血，每mL加入０.３mol/Ｌ抗凝劑乙二胺四乙酸二鈉（EDTA Na2+）2μL和抑肽酶500kU，４℃溫度下立即離心，3500r/min離心15min，取上清液低溫保存，采用放射免疫法（ＲＩＡ）測(cè)定，在廣州中醫(yī)藥大學(xué)核醫(yī)學(xué)中心測(cè)試，操作按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。 采用ＳＰＳＳ13.0for windows統(tǒng)計(jì)軟件。