[發明專利]一種微生物油脂的提取方法

在審

• 申請號: 201711068749.X
• 申請日: 2017-11-03
• 公開（公告）號: CN107723319A
• 公開（公告）日: 2018-02-23
• 發明（設計）人: 劉沁;李璐;劉心
• 申請（專利權）人: 常州市鑫嘉生物科技有限公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12P19/14;C11B3/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京風雅頌專利代理有限公司11403
• 代理人: 馬驍

技術領域

本發明屬于生物領域，具體涉及一種微生物油脂的提取方法。

背景技術

微生物油脂（microbialoil）又稱單細胞油脂（singlecelloil，SCO），是由酵母、霉菌、細菌和藻類等產油微生物利用碳水化合物、碳氫化合物和普通油脂為碳源、氮源、輔以無機鹽在一定條件下生產的油脂。相對于動植物油脂，微生物油脂生產周期短，不受季節與氣候限制，原料來源廣，基本不占用額外耕地資源，易于實現規模生產，被認為是很有潛力的新型油脂資源。長期以來，微生物油脂作為一種重要的油脂原料，一直是生物化工重要的研究對象。微生物油脂可以用作食品上重要油脂的替代品（如可可脂等），還可以提供有益人類健康的各類功能性油脂，最近，微生物油脂還被用于生物柴油的原料。總體而言，微生物油脂的油脂脂肪酸組成決定了微生物油脂的用途。通過現代分子生物學手段可以改變菌株油脂的結構與組成，但基因改造一般周期較長，且對于油脂微生物，有效的生物分子信息不多。因此，尋找一種簡單、高效、周期短的微生物油脂改造方法十分重要。

油脂積累量能超過細胞干重的20%的微生物，即稱為產油微生物(Oleaginous microorganisms)。產油微生物油脂積累過程是一個高度依賴生長環境的生物過程，尤其是營養可得性。早期研究表明，產油微生物在培養基中的碳源過量而其它營養元素不足的條件下能將多余的碳源儲存為胞內油脂，這些限制性營養元素包括氮、磷、鋅、鐵和鎂等。至今為止，氮源限制是促發微生物積累油脂的最普遍手段，通常采用較高的C/N比來實現。如當培養基中的C/N比從83.5上升到133.5 時，深黃被孢霉的油脂含量從原來的50.0％增加到56.0％，刺孢小克銀漢霉 （Cunninghamellaechinulata）的油脂含量從36.0％增加到47.0％。此外，也有人嘗試采用磷元素限制或者硫元素限制等方式，提高微生物積累油脂的能力。例如吳思國等在研究圓紅冬孢酵母積累油新方法，采用磷元素限制的方式，調控微生 物油脂的含量，結果表明，當C/P從72上升到9552時微生物油脂的含量從 21.2％上升到62.1％；采用硫元素限制方式能夠取得類似結果，當C/S從150上升到18310時微生物油脂的含量從20.8％到55.8％。

目前微生物油脂的獲得方式是將微生物菌種通過發酵得到獲得大量微生物，然后進行預處理，通過有機溶劑提取、脫溶得到微生物毛油或是采用水熱法在堿性條件下通過高溫高壓進行細胞破壁、得到油脂或是利用產油微生物轉化高糖植物菊芋，獲取微生物油脂等。這些方法雖然都能獲取到微生物油脂，但是像水熱法所得產油微生物溶漿通過離心進行油水分離，但由于得到的產油微生物溶漿為含有微生物渣的乳狀液，油相和水相混合均勻，難以分離，通過離心進行油水分離能耗較高、油脂提取率較低。因此，發明出一種高效提取微生物油脂的方法是一件非常有必要的事。

發明內容

本發明所要解決的技術問題：針對目前產油微生物溶漿通過離心進行油水分離，但由于得到的產油微生物溶漿為含有微生物渣的乳狀液，油相和水相混合均勻，難以分離，通過離心進行油水分離能耗較高、油脂提取率較低的問題，提供一種微生物油脂的提取方法。

為解決上述技術問題，本發明采用如下所述的技術方案是：

一種微生物油脂的提取方法，其特征在于，該制備方法包括如下步驟：

（1） 生物乙醇廢水-木薯粉水解液的制備：取木薯粉與生物乙醇廢水混合均勻，得生物乙醇廢水-木薯粉混合液，將生物乙醇廢水-木薯粉混合液的pH調至6.0，并在90~95℃糊化，得生物乙醇廢水-木薯粉糊化液，將生物乙醇廢水-木薯粉糊化液的pH調至6.5，向乙醇廢水-木薯粉糊化液加入氯化鈣溶液和α-淀粉酶，攪拌，得生物乙醇廢水-木薯粉反應酶液，向生物乙醇廢水-木薯粉反應酶液中加入糖化酶，攪拌，離心，取上清液，得生物乙醇廢水-木薯粉水解液；