[發明專利]一種牡丹籽活性肽及制備方法

在審

• 申請號: 201711068427.5
• 申請日: 2017-11-02
• 公開（公告）號: CN107836562A
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發明（設計）人: 林峰
• 申請（專利權）人: 林峰
• 主分類號: A23J1/00
• 分類號: A23J1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種牡丹籽活性肽及制備方法。

背景技術

牡丹是毛茛科、芍藥屬植物，為多年生落葉小灌木。將牡丹的根加工制成“丹皮”，是名貴的中草藥。其性微寒，味辛，無毒，入心、肝、腎三經，有散瘀血、清血、牡丹和血、止痛、通經之作用，還有降低血壓、抗菌消炎之功效。久服可益身延壽、養血和肝、散郁祛瘀，適用于面部黃褐斑、皮膚衰老，常飲氣血活肺、容顏紅潤，改善月經失調、痛經，止虛汗、盜汗。牡丹籽是牡丹植株的精華結晶，傳承了牡丹本身具有的一切特性外，它更有自己獨特的醫藥和營養成分，牡丹種子是受果殼和種殼雙層保護的堅果，具有天然的“長壽”基因。

申請號CN201610134873.0公開了“一種牡丹籽降血糖肽及其純化方法和應用”其制備方法如下：(1)牡丹籽脫脂粉與水混合均勻，超聲攪拌提取蛋白，離心，所得沉淀重復提取兩次，合并上層液體并使用1mol/L HCl調節pH至4～4.5，離心，取沉淀進行冷凍干燥，得牡丹籽蛋白；(2)配制1～3％牡丹籽蛋白溶液，使用胰蛋白酶超聲輔助酶解，反應結束，沸水浴10～15min進行滅酶，即可得到牡丹籽降血糖肽。在酶解過程中使用胰蛋白酶單一酶酶解，不利于蛋白質的徹底酶解。在分離純化過程中使用樹脂進行離子交換吸附、C～18反相色譜柱分離，其成本昂貴，不適合工業化生產。最后采用冷凍干燥而不是噴霧干燥，不利于工業化應用。

公開號CN104041901B公布了“一種牡丹肽飲料及其制備方法”，其中制備牡丹肽步驟如下：1牡丹籽仁用pH值為8.5～9.5的稀堿水浸泡除雜，洗滌、晾干、炒制得到炒牡丹籽仁；2加水研磨得到牡丹籽漿液；3調節PH值為7.5～9.6，然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為0.6～1.2％，保持溫度為40～50℃，控制攪拌槳攪拌轉數為100～200r/min，在無菌空氣下水解24～48h，水解結束后升溫至110～120℃進行高溫滅活，過濾除渣，即制得牡丹肽溶液。酶解時間過長且需要無菌環境，對工廠的設備要求太高，且浪費時間成本。過濾步驟也只是簡單提起過濾除渣，未用過濾劑以及濾膜進一步處理。不利于牡丹肽的提純和口感。

發明內容

本發明第一目的在于提供一種牡丹籽活性肽。

本發明的另一目的在于提供上述活性肽的制備方法。

一種牡丹籽活性肽的制備方法，包括以下步驟：

A、將牡丹籽預處理，進行超微粉碎，過200～500目，加水混合，調節pH 8～9微堿化處理，浸泡18～24h。機械攪拌、反應罐中的料液離心分離，收取上清液；

B、在上清液中加入弱酸，沉淀蛋白質。調節上清液的pH值至4～6后，機械攪拌、離心，收取沉淀，沉淀即為牡丹籽蛋白；

C、將沉淀加水復溶，加熱，使得蛋白質變性，然后進行高壓均質；

D、調節上述溶液pH至5～10，加入專用酶制劑，酶解；

E、酶解結束之后，加入特定中藥組合，浸提滅酶結束后得粗酶解液；

F、將粗酶解液制成牡丹籽活性肽粉。

如上述的牡丹籽活性肽的制備方法，其特征在于，F步驟還包括：

F1：為將粗酶解液離心，然后過裝有特制過濾助劑組合的板框壓濾機過濾；

F2：將濾液采用孔徑為20～500nm的陶瓷膜過濾，制得澄清的活性肽透過液；

F3：將步驟F2中濾液進行蒸發濃縮，然后噴霧干燥得到精制牡丹籽活性肽粉。

如上述的牡丹籽活性肽的制備方法，其特征在于，F步驟還包括：

F11：將粗酶解液直接旋轉蒸發、均質乳化，然后噴霧干燥得到全營養牡丹籽活性肽粉。

如上述的牡丹籽活性肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟A中，進行超微粉碎可以提高酶解率，充分利用物質組分。

如上述的牡丹籽活性肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟B中，所述弱酸為醋酸、乳酸、檸檬酸中的一種或多種，時間8～12h。采用弱酸沉淀蛋白質，減少強酸對蛋白質營養物質的破壞，有利于優化活性肽的營養組分。

如上述的牡丹籽活性肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟C中，加熱溫度為75～100度，時間15～30分鐘。采用熱變性的方法，可以更加利于酶解，酶解更加充分。同時熱變性之后進行高壓均質，進一步提高酶解效率。

如上述的牡丹籽活性肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟D，專用酶制劑組合包括風味蛋白酶∶胰蛋白酶∶胃蛋白酶為1～2∶1～2∶2～3。研究發現其專用酶制劑組合的酶解效率遠大約單一酶的酶解效率。