[發明專利]解淀粉芽孢桿菌Rdx5及其應用

在審

• 申請號: 201711067357.1
• 申請日: 2017-10-23
• 公開（公告）號: CN107574137A
• 公開（公告）日: 2018-01-12
• 發明（設計）人: 徐正君;官穎;李輝;董逸倫;趙露;戎松浩;徐洪;高曉玲;李利華;陳榮軍
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01N63/04;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙)51211
• 代理人: 史姣姣

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及一種解淀粉芽孢桿菌Rdx5及其應用。

背景技術

水稻是我國乃至全世界最重要的糧食作物之一，全世界超過50％的人口以大米作為主要糧食。近年來隨著生活水平的提高，大米的消耗量與需求越來越大，對水稻的產量與質量要求也越來越高。相關研究表示，到2030年時水稻要增產40%才能滿足人類對大米的需求。科研工作者們都在致力于高產、抗病水稻品種的研發，但水稻的生產還是受到各種生物與非生物的脅迫，使得產量低于預期，其中就包括稻瘟病菌等引起的水稻病害，使水稻減產嚴重。稻瘟病是水稻三大病害之一，目前的防治方法主要是抗病品種的選育與化學防治為主， 化學防治效果好速度快方便又經濟，已經成為現今最主要的防治措施，但是化學防治容易使稻瘟病菌產生抗藥性且污染土壤環境，產生農藥殘留。所以我們積極的尋找新的防治手段，生物防治及生物農藥的研發就變得越來越重要，植物源、微生物源的生物農藥具有顯著的生物防治特征，與化學防治相比，顯得更加的平和，對環境的壓力較小，同時由于天然產物的進化關系，抗生素、植物源農藥種類繁多，靶點各異，效用因子眾多，能夠有效減弱稻瘟病菌抗藥性對試劑的耐受效果，同時延長產品的使用時間因此，生物農藥在未來將會受到更多的重視。因此探索發現能夠良好防治稻瘟病，自然環境中可以降解且對人體無害的新的抗菌物質，顯得非常的重要與迫切。

發明內容

本發明旨在提供一種解淀粉芽孢桿菌Rdx5，該菌株在Landy培養基，28-30℃培養產生的次生代謝產物對水稻稻瘟病具有強烈的拮抗作用。為水稻稻瘟病的防治提供新的菌株。

為解決上述技術問題，本發明通過以下技術方案實現：

菌株Rdx5，分類命名為解淀粉芽孢桿菌，拉丁文學名為Bacillus amyloliquefaciens ，于2017年7月15日保存于中國典型培養物保藏中心（CCTCC），其保存編號為CCTCCNO: M2017406，保存單位地址：湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學校內（武漢大學第一附小對面），武漢大學保藏中心。

所述解淀粉芽孢桿菌Rdx5從中藥材白芷中分離得到，該菌株在Landy培養基，28-30℃培養產生的次生代謝產物對水稻稻瘟病具有強烈的拮抗作用。

經檢驗分析，所述次級代謝產物中含有抑制稻瘟病病菌的活性物質，所述活性物質包括有蛋白酶、過氧化物酶、明膠酶、纖維素酶等。這些活性物質通過破壞真菌細胞壁結構造成真菌死亡從而防治水稻稻瘟病。

所述菌株Rdx5生長特性：所述解淀粉芽孢桿菌Rdx5在PDA培養基上生長，有褶皺，菌落圓形，邊緣整齊。革蘭氏染色后顯微鏡觀察結果：革蘭氏陽性菌

所述菌株Rdx5生理生化特性：

所述解淀粉芽孢桿菌Rdx5生理生化特征如下表1所示：

表1：

表2：

注：“+”為陽性，“-”為陰性 , ND表示未測定。

菌株Rdx5的鑒定：通過生理生化鑒定獲得菌株Rdx5的生理生化特征，從上表可見：菌株Rdx5芽孢橢圓，3℃不生長，不能利用檸檬酸鹽，硝酸鹽還原為陽性，氧化酶/吲哚試驗/卵黃磷脂酶都為陰性,能水解淀粉，并能利用多種糖醇產酸。參照《伯杰氏細菌鑒定手冊（第八版）》、東秀珠版《常見細菌系統鑒定手冊》的內容，菌株Rdx5的生理生化與解淀粉芽孢桿菌模式種比較可以鑒定菌株Rdx5為解淀粉芽孢桿菌。部分生理生化鑒定結果與標準的解淀粉芽孢桿菌生理生化特征有差異。例如：菌株Rdx5不能利用阿拉伯糖/木糖產酸，也不能耐受7%NaCl。但是我們又經過細菌的16SrDNA測序NCBI上比對，我們發現菌株Rdx5與解淀粉芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens（登錄號：NR 075005.1）具有最高的同源性，在Mega6.0中，將與其有相關性的代表細菌共同建立系統發育進化樹，認定其為解淀粉芽孢桿菌。

本發明具有以下有益效果：

本發明從中藥材白芷中篩選出菌株Rdx5，該菌株對水稻稻瘟病具有拮抗作用，同時菌株Rdx5的次生代謝產物對水稻稻瘟病也具有強烈的拮抗作用。為稻瘟病防治提供了新的微生物菌種；菌株Rdx5的1倍的發酵液過濾液濃度為0.025mL/mL對稻瘟病菌的抑制率達到了71.76％，抑菌效果好。

附圖說明

圖1為菌株Rdx5單菌落在PDA培養基上生長的形態圖。

圖2為菌株Rdx5對稻瘟菌餅的拮抗作用的結果圖；