[發明專利]蛋白質純化

在審

• 申請號: 201711066852.0
• 申請日: 2011-07-26
• 公開（公告）號: CN107793477A
• 公開（公告）日: 2018-03-13
• 發明（設計）人: M·斯皮塔利;J·西蒙斯;R·懷特康比;M·R·皮爾斯-黑金斯
• 申請（專利權）人: UCB醫藥有限公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00;C07K1/36;C07K1/18;C07K1/34
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所11038
• 代理人: 袁泉

1.用于從周質細胞提取物中純化抗體片段的方法，其包括：

a)第一色譜步驟以捕獲抗體片段，其中含有抗體片段濃度為至少1.5g/L的混合物進行陽離子交換色譜并隨后洗脫以產生含有所述抗體片段的第一洗脫物；以及

b)第二色譜步驟，其中第一洗脫物進行陰離子交換色譜以捕獲雜質并產生含有抗體片段的流出液。

2.根據權利要求1的方法，其中的方法包含不超過兩個色譜步驟。

3.用于從周質細胞提取物中純化抗體片段的方法，其基本上由以下步驟構成：

a)第一色譜步驟以捕獲抗體片段，其中含有抗體片段濃度為至少1.5g/L的混合物進行陽離子交換色譜并隨后洗脫以產生含有所述抗體片段的第一洗脫物

b)對第一洗脫物進行的第一次超濾；

c)第二色譜步驟，其中純化的第一洗脫物進行陰離子交換色譜以捕獲雜質并產生含有抗體片段的流出液；以及

d)對流出液進行的第二次超濾。

4.根據權利要求1-3中任何一項的方法，其中所有色譜步驟都是在色譜柱上進行的。

5.根據權利要求1-4中任何一項的方法，其中陽離子交換色譜是以洗脫模式進行的。

6.根據權利要求1-5中任何一項的方法，其中第一陽離子色譜步驟按順序包含以下步驟：

a)將含有抗體片段的混合物如周質細胞提取物加樣至陽離子交換柱，

b)用洗滌緩沖液洗滌陽離子交換柱，其中在洗滌期間緩沖液的導電率、pH和鹽濃度基本上保持不變，以及

c)用洗脫緩沖液洗脫抗體片段。

7.根據權利要求6的方法，其中在第一色譜步驟之前，洗滌緩沖液的pH與含有抗體片段的混合物的pH相同。

8.根據權利要求6或7的方法，其中含有抗體片段的混合物在第一色譜步驟前具有的pH為4.0-5.0。

9.根據權利要求1-8中任何一項的方法，其中第一色譜步驟中，含有抗體片段的混合物在進行陽離子交換色譜前含有的細菌宿主細胞蛋白質的量為大約200μg/ml-10,000μg/ml。

10.根據權利要求1-9中任何一項的方法，其中第一色譜步驟中的陽離子交換色譜是在至少300cm/h的流速下進行的。