[發(fā)明專利]用于對照核酸的通用基質(zhì)在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711064046.X | 申請日： | 2011-12-16 |
| 公開（公告）號： | CN107586828A | 公開（公告）日： | 2018-01-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | M.艾克霍夫;E.魯斯曼;A.韋爾費(fèi)爾施奈德;D.齊默曼 | 申請（專利權(quán)）人： | 霍夫曼－拉羅奇有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6806 | 分類號： | C12Q1/6806;C12M1/00;C12M1/36;C12M1/34 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司72001 | 代理人： | 翟建偉,魯煒 |
| 地址： | 瑞士*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 對照 核酸 通用 基質(zhì) | ||
1.一種分離、擴(kuò)增和檢測至少一種流體樣品中可能存在的至少一種目標(biāo)核酸的方法，其中所述流體樣品是體液，所述方法包括自動化步驟：
a. 向所述流體樣品添加內(nèi)部對照核酸；
b. 在足以允許包含所述目標(biāo)核酸的核酸以及所述內(nèi)部對照核酸固定在固相支持物材料上的時間段和條件下，將固相支持物材料和所述流體樣品在容器中組合在一起；
c. 在分離站中從所述流體樣品中存在的其他材料中分離出所述固相支持物材料；
d. 在所述分離站中純化所述核酸以及用洗滌緩沖液洗滌所述固相支持物材料一次或更多次；
e. 使至少第一容器中的純化的目標(biāo)核酸和純化的內(nèi)部對照核酸，以及至少第二容器中水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸與一種或更多種擴(kuò)增試劑接觸；
f. 在足以發(fā)生指示所述目標(biāo)核酸和所述對照核酸的存在或不存在的擴(kuò)增反應(yīng)的時間段和條件下，在所述反應(yīng)容器中孵育所述純化的目標(biāo)核酸、所述純化的內(nèi)部對照核酸和所述在水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸與所述一種或更多種擴(kuò)增試劑，
其中步驟e到f中擴(kuò)增的條件對于所述純化的目標(biāo)核酸、所述內(nèi)部對照核酸和所述在水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸是相同的，且其中所述在水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸經(jīng)歷步驟a之后的步驟。
2.前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述水性緩沖液具有6-12的pH值并包含：
? Tris：1-100 mM
? EDTA：0.01-1 mM
? 疊氮化鈉 ： 0.005-0.5%（w/v）
? Poly（rA）RNA： 1-200 mg/l。
3.權(quán)利要求2的方法，其中所述水性緩沖液具有約8的pH值并包含：
? Tris：10 mM
? EDTA：0.1 mM
? 疊氮化鈉 ： 0.05%（w/v）
? Poly（rA）RNA： 20 mg/l。
4.權(quán)利要求1的方法，其中陰性對照經(jīng)歷步驟a之后的所有步驟。
5.前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述在水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸經(jīng)歷步驟a之后的步驟。
6.前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中至少一種流體樣品是臨床樣品。
7.前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，進(jìn)一步包括以下步驟：
g. 測定所述目標(biāo)核酸的量。
8.一種用于擴(kuò)增可能存在于至少一種流體樣品中的目標(biāo)核酸的分析系統(tǒng)（440），所述系統(tǒng)包括：
? 包含反應(yīng)容器的擴(kuò)增站，所述反應(yīng)容器包含擴(kuò)增試劑、純化的目標(biāo)核酸和純化的內(nèi)部對照核酸，以及水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸，
其中所述在水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸被包含在與所述純化的目標(biāo)核酸不同的容器內(nèi)。
9.權(quán)利要求8的分析系統(tǒng)，進(jìn)一步包括：
? 包含固相支持物材料的分離站，所述分離站被構(gòu)建和布置以分離和純化所述至少一種流體樣品中包含的核酸。
10.權(quán)利要求8或9的任一項(xiàng)的分析系統(tǒng)，其中所述擴(kuò)增站包含的所述反應(yīng)容器被布置為整合的裝置。
11.權(quán)利要求10的分析系統(tǒng)，其中所述整合的裝置是多孔平板，所述在水性緩沖液中的至少一種外部對照核酸被包含在與所述純化的目標(biāo)核酸不同的反應(yīng)孔中。
12.權(quán)利要求8到11的任一項(xiàng)的分析系統(tǒng)，其中所述擴(kuò)增站進(jìn)一步包括處在與所述純化的目標(biāo)核酸不同的容器中的陰性對照以及所述水性緩沖液中的外部對照核酸。
13.權(quán)利要求12的分析系統(tǒng)，其中所述陰性對照是充當(dāng)所述外部對照核酸的流體基質(zhì)的相同的緩沖液。
14.權(quán)利要求8到13的任一項(xiàng)的分析系統(tǒng)，進(jìn)一步包括選自以下構(gòu)成的組的一個或更多個元件：
? 用于檢測被分析物引起的信號的檢測模塊
? 封閉器
? 用于試劑和/或用完可棄物的存儲模塊
? 用于控制系統(tǒng)部件的控制單元。
15.權(quán)利要求1到7的任一項(xiàng)的方法，或權(quán)利要求8到14的任一項(xiàng)的分析系統(tǒng)，包含超過一種外部對照核酸。
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