[發(fā)明專利]一種傳統(tǒng)大醬抗疲勞作用的檢測方法

在審

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• 申請日: 2017-10-26
• 公開（公告）號: CN107632124A
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 崔承弼;崔清美;齊欣;史得君;陳兆雙
• 申請（專利權(quán)）人: 延邊大學(xué)
• 主分類號: G01N33/02
• 分類號: G01N33/02;G01N33/53
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及大醬抗性技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種傳統(tǒng)大醬抗疲勞作用的檢測方法。

背景技術(shù)

大豆作為一年生豆科植物，其種子含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪等成分。我國是大豆的原產(chǎn)地，尤其以東北地區(qū)為主要栽培區(qū)，是我國人民膳食中主要食品之一。從古至今，中華民族已研發(fā)制作出各種各樣的大豆制品。其中大豆發(fā)酵食品，例如大醬，納豆等，不僅有獨特的風(fēng)味，而且滋味鮮美，營養(yǎng)也極其豐富。據(jù)已有研究表明，這些發(fā)酵大豆制品中富含的獨特生物活性物質(zhì)，對人體有多種好處，各種活性物質(zhì)間相互作用，使得大豆發(fā)酵食品能夠擁有獨特的生理功能。

朝鮮族大醬是我國的一種傳統(tǒng)食品，就是以大豆為主要原料，加入面粉等輔助原料經(jīng)過破碎，制曲等步驟在低溫下發(fā)酵而制成。研究表明：它可以起到降低膽固醇、抗突變、抗疲勞、抗氧化、抗癌、抗腫瘤等多種生理功能。具有這些功能的主要生理功能性物質(zhì)分為兩類：其中一類是大豆本身的固有成分，即異黃酮類、多肽類、多酚類、皂苷類。另一類則是在微生物及多種酶的共同作用下，使得大豆原料中的蛋白質(zhì)等大分子有機物，進行分解和重組，經(jīng)過一系列復(fù)雜的生化作用，從而形成了獨特的生物活性物質(zhì)，這就是發(fā)酵過程中形成的二次成分，也是發(fā)酵大醬生理活性更高的實質(zhì)所在。

疲勞是指機體生理不能保持其機能在一特定水平上和不能維持預(yù)定的運動強度。運動能力快速降低是其主要表現(xiàn)形式，包括能量和做功無法達到目的水平。現(xiàn)已開發(fā)的抗疲勞功能成分有辣椒素、抗疲勞肽及牛磺酸等。大豆多肽作為抗疲勞肽產(chǎn)品之一，已受到廣泛的認可。大豆多肽的制備，首先是選擇優(yōu)質(zhì)大豆蛋白為主要原料，然后經(jīng)過水解、分離和精制等一系列操作最終獲得低肽混合物，其通常由3-10個氨基酸組成，這些氨基酸的結(jié)構(gòu)幾乎與大豆蛋白一樣，其氨基酸中必需氨基酸平衡且良好、含量非常豐富，具有很高的營養(yǎng)價值，是一種較理想的抗疲勞產(chǎn)品。促進紅細胞的復(fù)原，提高紅細胞攜氧能力或直接向肌肉供能，抑制氧自由基等為其抗疲勞機理所在。與傳統(tǒng)大豆蛋白相比，大豆多肽更易于人體消化吸收，能夠迅速給機體供能。在醫(yī)藥、食品等行業(yè)有廣闊的應(yīng)用和發(fā)展前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點，而提出的一種傳統(tǒng)大醬抗疲勞作用的檢測方法。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

一種傳統(tǒng)大醬抗疲勞作用的檢測方法，具體包括以下步驟：

S1、大醬的制作：取實驗室自制醬曲2505g破碎后入壇，加入6000ml的水，攪拌均勻，接地衣芽孢桿菌0.06g，放置低溫冷藏箱中發(fā)酵一周后加無碘鹽1270g，使醬中鹽濃度控制在13％左右，并于低溫冷藏箱中發(fā)酵；

S2、實驗小鼠的飼養(yǎng)：選取40只健康的雄性清潔級昆明種小鼠，小鼠體重維持在20±2g，相對濕度為45％-65％，室溫設(shè)置24℃±2℃，要及時供給食物和飲水，使其適應(yīng)1周后，方可開始試驗；

S3、大醬溶液的制備：從S1中取出發(fā)酵兩個月后的大醬約30g并置于攪拌機中攪碎后分別取4g、8g、16g各加入蒸餾水200ml定容，分別配置成濃度分別為0.02g/ml、0.04g/ml、0.08g/ml的溶液，即大醬低、中、高劑量；

S4、受試物劑量設(shè)計：將S2中的小鼠隨機分成四組，并用標號標記，即空白對照組、低濃度大醬溶液組、中濃度大醬溶液組、高濃度大醬溶液組，將S3中低、中、高劑量分別設(shè)定為0.2g/kg/d、0.4g/kg/d、0.8g/kg/d，并經(jīng)口灌胃攝入受試物，同時空白對照組灌以等體積的蒸餾水；

S5、小鼠爬桿時間的檢測：在每次大醬溶液灌胃30min后，分別將各組小鼠依次放置于爬桿架的有機玻璃圓柱上，圓柱直徑0.8～1.0cm，下端距水面約20cm，用秒表記錄小鼠從被放上圓柱到滑落水中間隔的時間，累計3次作為小鼠的爬桿時間；

S6、小鼠負重游泳時間的檢測：在每次灌胃30min后，在各組小鼠尾部負重5％體重的鉛皮，分別將負重小鼠依次放于游泳箱中，進行力竭性游泳試驗，力竭標準為小鼠的嘴和鼻子在水面下8s不抬頭，則可判定小鼠力竭，記錄每只小鼠自游泳開始至力竭沉入水中死亡的時間，將其作為小鼠的游泳時間；

S7、小鼠體重及臟器系數(shù)的檢測：試驗過程中，每3d進行一次小鼠體重的測量，解剖后測定不同試驗劑量組小鼠不同臟器的濕重，計算它們與單位體重(100g)的比值，計算出臟器系數(shù)；

S8、小鼠肝糖原、肌糖原儲備量的檢測：

1)葡萄糖標準曲線的繪制