[發(fā)明專利]一種支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型及其構(gòu)建方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711060041.X
• 申請(qǐng)日: 2017-11-01
• 公開（公告）號(hào): CN107744589A
• 公開（公告）日: 2018-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張慶祥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K39/35
• 分類號(hào): A61K39/35;A61K39/10;A61K49/00
• 代理公司: 北京智橋聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11560
• 代理人: 侯桂麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型及其構(gòu)建方法。

背景技術(shù)

在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中，建立動(dòng)物模型以代替真實(shí)的研究客體，已成為醫(yī)學(xué)研究中的常用方法。

中醫(yī)實(shí)驗(yàn)是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，利用現(xiàn)代科學(xué)的研究方法和技術(shù)來研究、發(fā)展中醫(yī)學(xué)的一種手段。對(duì)于中醫(yī)來說，它以“證”為診療的主體，所以中醫(yī)造模是以建立相應(yīng)“證”的模型為主要目的。中醫(yī)動(dòng)物模型的造模方法大致分為三種類型：一是模擬中醫(yī)傳統(tǒng)病因建立動(dòng)物模型，包括單因素造模和復(fù)合因素造模；二是采用西醫(yī)病因病理復(fù)制動(dòng)物模型，包括化學(xué)、生物、物理、機(jī)械、綜合因素刺激法；三是依據(jù)中西醫(yī)結(jié)合病因?qū)W說塑造動(dòng)物模型。

對(duì)于西醫(yī)來說，其診療針對(duì)“病”而言，“病”的復(fù)制就成了西醫(yī)模型的目的，它是用人為的方法使動(dòng)物在一定的致病因素(機(jī)械的、物理的、化學(xué)的、生物的)作用下，造成動(dòng)物組織器官或全身一定的損害，出現(xiàn)類似人類疾病的功能、代謝或形態(tài)方面的變化。雖然依據(jù)不同的理論體系，復(fù)制目標(biāo)不同，但最終導(dǎo)致的結(jié)果都是一樣的，即使動(dòng)物出現(xiàn)與人相似的病變。

支氣管哮喘屬于中醫(yī)哮證，為一發(fā)作性的痰鳴氣喘疾患，發(fā)作時(shí)喉中哮鳴有聲，呼吸急促困難，甚則喘息不能平臥，是臨床的常見病、多發(fā)病。它是由臟腑功能失調(diào)或虛弱，復(fù)因外邪觸發(fā)內(nèi)伏之宿痰，導(dǎo)致痰氣相搏、氣道阻塞引起的發(fā)作性痰鳴氣喘疾患。支氣管哮喘病寒飲蘊(yùn)肺證發(fā)生的關(guān)鍵是肺陽虛的體質(zhì)，中心環(huán)節(jié)是其“夙根”，即內(nèi)伏之痰飲。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為TH1/TH2類細(xì)胞因子失衡、細(xì)胞因子、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)及其組織抑制劑(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)、遺傳學(xué)因素、神經(jīng)調(diào)節(jié)等在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用。在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論指導(dǎo)下的支氣管哮喘動(dòng)物造模多采用卵蛋白致敏，導(dǎo)致大鼠支氣管哮喘病。

如何將現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的病和中醫(yī)學(xué)的證結(jié)合起來共同制備一個(gè)中西醫(yī)結(jié)合的病證結(jié)合的大鼠模型對(duì)于支氣管哮喘的研究具有極其重要的意義，這也是目前為止相關(guān)研究的不足之處。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷和不足，本發(fā)明提供了一種支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型及其構(gòu)建方法，該病證結(jié)合的支氣管哮喘大鼠模型對(duì)于支氣管哮喘的中西醫(yī)結(jié)合治療均有很大幫助。

根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供了一種支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型的構(gòu)建方法，包括以下步驟：

(1)在大鼠腹腔內(nèi)注射1mL抗原液使大鼠致敏，2周后激發(fā)哮喘時(shí)，分別把各組大鼠置于半密閉鼠籠中，霧化吸入卵清白蛋白生理鹽水對(duì)大鼠進(jìn)行激發(fā)；

(2)在激發(fā)期間，對(duì)大鼠施加寒冷刺激和勞累刺激的雙重刺激，得到支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型。

以上諸多刺激施加于大鼠，使其外感于寒、內(nèi)傷于陽，內(nèi)外合邪，從而使肺陽虛衰，宣降失常，寒飲內(nèi)停于肺。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，步驟(1)中，在每毫升所述抗原液中含卵清白蛋白100mg、氫氧化鋁100mg以及滅活百日咳桿菌疫苗5x 10⁹個(gè)。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，步驟(1)中，所述卵清白蛋白生理鹽水中，卵清白蛋白的濃度為0.05mg/mL。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，步驟(1)中，霧化時(shí)間為30～60min，每日霧化1次，連續(xù)霧化8～10天。例如，霧化時(shí)間為40min，每日霧化1次，連續(xù)霧化8天。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，步驟(2)中，所述寒冷刺激是指將大鼠放置于氣溫為0±4℃的環(huán)境，每天放置12h，并且使大鼠日常飲用冰水并給予寒性食物。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，步驟(2)中，所述勞累刺激是指每天讓大鼠在0±2℃的冰水中游泳30～45min。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了如上所述的構(gòu)建方法所得到的支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型。

本發(fā)明在現(xiàn)代中西醫(yī)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，依據(jù)“形寒飲冷則傷肺”、“勞則氣耗”、“氣分陰陽”等理論，構(gòu)建了支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型，該病證結(jié)合的支氣管哮喘大鼠模型對(duì)于支氣管哮喘的中西醫(yī)結(jié)合治療均有很大幫助；此外，該造模方法簡單、易于操作和推廣，貼近臨床特點(diǎn)。

附圖說明