[發(fā)明專利]一種檢測飼料中己烯雌酚的酶聯(lián)免疫試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711057842.0
• 申請日: 2017-11-01
• 公開（公告）號: CN109752524A
• 公開（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 洪霞;杜霞;張淑雅
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇維賽科技生物發(fā)展有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測己烯雌酚的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于包括有：

(1)包被有己烯雌酚偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板；

(2) 己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

(3)濃縮酶結(jié)合物；

(4)酶結(jié)合物稀釋液；

(5)底物顯色液；

(6)終止液。

2.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于所述己烯雌酚偶聯(lián)抗原是由己烯雌酚半抗原與載體蛋白偶聯(lián)得到，所述己烯雌酚半抗原結(jié)構(gòu)如下：

。

3.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于所述己烯雌酚半抗原的制備方法主要

包括如下步驟：

1)取20 mg己烯雌酚，10ul，1，3-丙二胺，催化量的4-二甲氨基吡啶溶解于2ml

N，N’-二甲基甲酰胺中，得到I液；

2)取20mg N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺溶解于0.5mlDMF中，得到II液；

3)在0℃條件下，將II液緩慢滴加至I液中，恢復(fù)室溫后，繼續(xù)反應(yīng)20 h；

4)蒸除溶劑，柱層析(洗脫液：二氯甲烷／甲醇，體積比20：1)，得到己烯雌酚半抗

原。

4.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于所述的濃縮酶結(jié)合物為酶標(biāo)記的己烯雌酚單克隆抗體。

5.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于所述濃縮酶結(jié)合物的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶；酶結(jié)合物是采用過碘酸鈉法將酶標(biāo)記物與抗體偶聯(lián)得到。

6.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于：所述的終止液為1~2mol/L的硫酸或鹽酸

溶液，所述底物顯色液由底物液A液和底物液B液組成，底物液A液為過氧化脲溶液，底物液B液為四甲基聯(lián)苯胺溶液。

7.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于所用包被緩沖液為PH9.6，0.1mol/L碳酸鹽緩沖液，所用封閉液為PH7.2~7.4，0.5%~1%牛血清白蛋白，0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，所述百分比為重量百分比。

8.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于所述的酶結(jié)合物稀釋液為PH7.2~7.4，含0.5%~1%牛血清白蛋白，0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液，所述百分比為重最百分比。

9.如權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在r所述己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度分別為0ug/L、1ug/L、3ug/L、9ug/L、27ug/L、81ug/L。

10.一種檢測樣品中己烯雌酚含量的方法，主要步驟包括：

1)將待測樣品進(jìn)行前處理；

2)用權(quán)利要求1—9任意一項所述的酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行檢測；

3)分析檢測結(jié)果。