[發明專利]一種高載量金屬螯合親和層析介質

有效

• 申請號: 201711054170.8
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN107754769B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 瞿歡歡;朱至放
• 申請（專利權）人: 蘇州博進生物技術有限公司
• 主分類號: B01J20/24
• 分類號: B01J20/24;B01J20/30;B01D15/38;C07K1/22
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 韓飛

本案涉及高載量金屬螯合親和層析介質，以硅膠微球為內核，所述硅膠微球設有孔道，在硅膠微球表面及孔道內附著有羧甲基殼寡糖分子，羧甲基殼寡糖分子一部分絡合有第一金屬離子以形成第一層金屬螯合，剩余部分鍵合有烯丙基縮水甘油醚，烯丙基縮水甘油醚連接有配基，配基絡合有第二金屬離子以形成第二層金屬螯合；本發明成功地在介質表面固載了雙金屬層，有效提高了金屬親和層析介質的固載量，這種改進方法簡單，生產成本低，利于大規模推廣應用。

技術領域

本發明涉及一種層析介質，具體涉及一種高載量金屬螯合親和層析介質。

背景技術

蛋白質的高效分離純化是生物制藥、基因工程、生命科學研究等順利開展的前提和基礎，根據蛋白質自身的尺寸大小不同、溶解能力及所帶電荷數的不同，純化蛋白質的方法也不盡相同。其中，金屬螯合親和層析技術是基于蛋白質表面的一些氨基酸殘基與固定化金屬離子的親和力不同而對蛋白質進行分離純化，具有特異性強、金屬離子可選擇種類多、吸附目標蛋白相對穩定、層析柱可連續使用或再生等優勢而日益受到人們的關注。

金屬螯合親和層析介質主要由固體基質、螯合配基和金屬離子三部份構成，而且這些組成部分都會對最終層析柱吸附分離蛋白質產生不同程度的影響。評價金屬螯合層析介質性能的指標有很多，如粒徑及其分布、流通性能、孔道結構及載量等，其中，載量是最重要的指標之一，用以表征介質的吸附性能。高載量介質能大大增加柱承載能力，提升純化能力，降低分離純化成本。但是，現有金屬螯合親和層析介質的結構單一，普遍存在蛋白載量較低，分離純化效率不高的問題。

發明內容

針對現有技術的不足之處，本發明的目的在于提供一種高載量金屬螯合親和層析介質。

本發明的技術方案概述如下：

以硅膠微球為內核，所述硅膠微球設有孔道，所述硅膠微球表面及孔道內附著有羧甲基殼寡糖分子；所述羧甲基殼寡糖分子一部分絡合有第一金屬離子以形成第一層金屬螯合，剩余部分鍵合有烯丙基縮水甘油醚；所述烯丙基縮水甘油醚連接有配基；所述配基絡合有第二金屬離子以形成第二層金屬螯合。

優選的是，所述第一金屬離子選自Cu²⁺、Fe³⁺、Ni²⁺、Zn²⁺、Co²⁺、Ca²⁺中的一種。

優選的是，所述第二金屬離子選自Cu²⁺、Ni²⁺、Zn²⁺、Co²⁺中的一種。

優選的是，所述第二金屬離子與所述第一金屬離子的摩爾比為1∶8～10。

優選的是，所述羧甲基殼寡糖分子的聚合度在5～15之間。

優選的是，所述硅膠微球的粒徑為30～100μm，所述孔道的平均孔徑為8～12nm。

優選的是，所述配基為亞氨基二乙酸、三羥甲基乙二胺、次氨基三乙酸中的一種。