[發明專利]一種蘇云金芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201711053773.6
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN107603918B
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 宋健;杜立新;曹偉平
• 申請（專利權）人: 河北省農林科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;A01N63/02;A01P7/04;C12R1/07
• 代理公司: 11424 北京修典盛世知識產權代理事務所(特殊普通合伙)
• 代理人: 胡長遠

1.一種蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）菌株DK49，其保藏編號為：CGMCCNo.14761。

2.一種微生物殺蟲劑，其特征在于所述的微生物殺蟲劑含有權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）DK49。

3.根據權利要求2所述的微生物殺蟲劑，其特征在于其劑型為液體。

4.權利要求2所述微生物殺蟲劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）、將低溫保存的蘇云金芽孢桿菌菌株DK49在LB平板培養基上活化12～16 h，挑取單菌落在LB斜面培養基上，在29～31℃培養3～5天，得活化的菌株；其中所述的LB液體培養基或LB斜面培養基的組成成分及其重量比為：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，瓊脂粉15g，水1L；

（2）、用無菌接種環刮取一環步驟（1）中活化的菌株接種到50ml LB液體培養基中，在溫度為29～31℃、轉速為200～220 rpm條件下培養10～14 h，得種子液；其中所述的LB液體培養基的組成成分及其重量比比例為：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，水1L；

（3）、按照體積比為1～2%的比例將步驟（2）所得的種子液接入到黃豆餅淀粉培養基中，在溫度為29～31℃，轉速為200～220 rpm條件下培養48～60 h，得發酵液；其中所述黃豆餅粉培養基的組成成分及其重量百分比為：黃豆餅粉2.7%、棉籽餅粉1.5%、玉米淀粉1.3%、酵母粉0.6%、KH₂PO₄ 0.02%、MgSO₄ 0.03%，其余為水，pH7.2；

（4）、將步驟（3）所得的發酵液的pH值調節至4.5～5.5，按照質量百分比為0.02～0.1%的比例向發酵液中添加苯甲酸鈉，混合均勻，即得微生物殺蟲劑。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于其步驟（4）為：將步驟（3）所得的發酵液在4℃、轉速為5000rpm條件下離心30 min，棄掉上清液，得沉淀物；用水稀釋沉淀物至1×10⁷ cfu/mL濃度，調節pH值至4.5～5.5，按照重量百分比為0.02～0.1%的比例添加苯甲酸鈉，混合均勻，即得微生物殺蟲劑。

6.權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）DK49在防治寡毛跳甲屬（Luperomorpha）害蟲上的應用。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于所述的寡毛跳甲屬害蟲是指蔥黃寡毛跳甲（Luperomorpha suturalis）、隆基寡毛跳甲（Luperomorpha clypeata）或黃胸寡毛跳甲（Luperomorpha xanthodera）。

8.權利要求2所述的微生物殺蟲劑在防治寡毛跳甲屬（Luperomorpha）害蟲上的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于所述的寡毛跳甲屬害蟲是指蔥黃寡毛跳甲（Luperomorpha suturalis）、隆基寡毛跳甲（Luperomorpha clypeata）或黃胸寡毛跳甲（Luperomorpha xanthodera）。