[發明專利]一種油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選鑒定方法

有效

• 申請號: 201711052840.2
• 申請日: 2017-10-30
• 公開（公告）號: CN107581061B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 黃銳之;官春云;王新發;李加納;劉忠松;林良斌;劉智宏;劉合芹;吳學龍;張冬青
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 張健

本發明公開了一種油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選鑒定方法，包括以下步驟：油菜材料選擇；將各待篩選的油菜材料在常規條件下種植；標記同一天開花的花朵，并取若干偶數個角果；每個油菜材料所取角果混合后，平均分為兩組，并將所有組角果分別以角果柄插入植物培養基，裝有各油菜材料角果的容器分別放入適溫組和高溫組植物生長箱或生長室中；角果培養環境設置；測量各處理樣品灌漿期高溫耐受性相關生物學指標；耐高溫油菜材料篩選。本發明操作性強、準確性高、重復性好、鑒定效率高、省時省能耗，在耐熱性品種選育和預測品種的生態適應性中具有廣泛的應用前景，為油菜種子灌漿期高溫耐受性遺傳改良提供技術基礎。

技術領域

本發明涉及作物育種技術領域，特別涉及一種油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選鑒定方法。

背景技術

高溫脅迫嚴重影響作物生長發育，是作物穩產高產的主要威脅。油菜種子發育期日平均溫度與含油量呈負相關，油菜成熟期氣溫在20℃以上、光照充足、晝夜溫差大、土壤濕度適宜有利于油分積累，產量和含油量高；而溫度過高，會導致“高溫逼熟”，植株衰老加速、灌漿期縮短，千粒重和含油量降低。近百年來，全球氣候變暖趨勢明顯，我國長江中下游地區初夏高溫熱浪日趨提前，油菜灌漿期經常會遭遇短期高溫，高溫脅迫對油菜等作物的不利影響日漸顯現，生產的不穩定性顯著增加。提高油菜等作物的高溫耐受性，建立高效、可靠的油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選技術是油菜耐高溫基因型篩選和遺傳改良的基礎，對快速準確地鑒定和篩選油菜耐熱材料、提高育種效率具有重要意義。然而到目前為止，尚未建立穩定、重復性好的的油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選技術，這不僅阻礙了耐熱油菜品種的培育，也削弱了對育成的油菜品種生態適應性的預判。

現有的作物高溫耐受性鑒定方法主要可分為田間直接鑒定、人工模擬直接鑒定和間接鑒定等3類。田間直接鑒定法是在自然高溫條件下，以作物較為直觀的性狀變化指標為依據來評價作物品種的高溫耐受性。該方法具有評價客觀的特點,但試驗結果易受其他環境因素的影響，重復性較差，為獲得可靠的結果，須進行多年多點的重復鑒定，費工費時。人工模擬直接鑒定法是在模擬的高溫脅迫條件下通過直觀性狀變化指標對作物高溫耐受性進行評價，這種方法能克服田間鑒定的缺點，逆境條件容易控制，但受設備投資和能源消耗等因素的限制，難以對大批量的材料進行鑒定，尤其不適合對油菜這樣植株高大作物的大規模篩選鑒定。間接鑒定法是利用植物產生的應激性生理反應，高溫耐受性不同的作物品種在高溫脅迫下會在許多生理生化指標上存在顯著差異，這些可以作為評價作物高溫耐受性的間接指標。現已報道諸多作物高溫耐受性間接鑒定方法，如通過測定電解質滲透率、細胞膜的熱穩定性，丙二醛、脯氨酸含量、SOD活性、POD活性、CAT活性等生理指標，從而間接鑒定作物高溫耐受性。雖然這些方法在植物營養生長期高溫耐受性篩選鑒定中發揮了重要作用，但由于植物的生殖生長階段與營養生長階段在基因表達、生理生化反應以及生長發育調節等諸方面均有著顯著差別，植物營養生長期的高溫耐受性并不一定與生殖生長期高溫耐受性一致，對油菜這樣以收獲種子為生產目標的作物，更需要建立油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選技術。

為此，迫切需要找到針對油菜種子灌漿期高溫耐受性的高效篩選技術。本發明提供了一個可行的解決方案，為大規模、快速、準確的評價油菜品種、種質資源高溫耐受性提供科學標準和方法，適合在油菜耐熱種質資源挖掘，高溫耐受性品種選育和預測品種的生態適應性中推廣應用，為油菜種子灌漿期高溫耐受性遺傳改良提供技術基礎。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明專利提供了一種灌漿期高溫耐受性油菜種子高效篩選鑒定方法，此方法操作性強、省時省能耗、準確性高、重復性好、鑒定效率高，能有效地區分油菜品種、材料高溫耐受性的差異，適合在油菜耐熱種質資源挖掘，耐熱性品種選育和預測品種的生態適應性中推廣應用，為油菜種子灌漿期高溫耐受性遺傳改良提供技術基礎。

為了實現上述發明目的，本發明的技術問題主要通過下述技術方案得以解決：一種油菜種子灌漿期高溫耐受性高效篩選鑒定方法，包括以下步驟：

A、油菜材料選擇：各待篩選油菜材料采用正常成熟的油菜種子；