[發(fā)明專利]一種白子菜培育方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711051625.0
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN107950390A
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 艾永冠;韋玲;李真真
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽華米生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A61K36/28;A61P11/00;A61P29/00;A61P11/14;A61P31/04;A61P27/02;A61P19/02;A61P15/00;A61P7/04;A61P19/08;A61P15/14;A61P17/02
• 代理公司: 合肥維可專利代理事務(wù)所(普通合伙)34135
• 代理人: 吳明華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及白子菜側(cè)芽培育領(lǐng)域，特別涉及一種白子菜的培育方法和該白子菜的黃酮提取方法。

背景技術(shù)

白子菜別名接骨丹、茹童菜、大綠葉、土田七、散血姜、白子菜、雞菜、大肥牛、叉花土三七、白背三七、百子菜、富貴菜、菊三七、雞菜、白背菜、又聞又清。菊科菊三七屬植物，以全草入藥。夏秋采集，洗凈切片，鮮用或曬干。味甘、淡，寒。可用于清熱解毒，舒筋接骨，涼血止血。用于支氣管肺炎，小兒高熱，百日咳，目赤腫痛，風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛，崩漏；外用治跌打損傷，骨折，外傷出血，乳腺炎，瘡瘍疔腫，燒燙傷。

現(xiàn)有技術(shù)中，通過對白子菜的側(cè)芽進行培養(yǎng)基培養(yǎng)，然后采用瓶接種外植體進行叢生芽形成和培養(yǎng)然后進行生根培養(yǎng)，再進行移植，在這個過程中，側(cè)芽莖段需要經(jīng)過多次的生存環(huán)境轉(zhuǎn)移而且需要采用瓶進行培養(yǎng)，會造成莖段的損傷，實際應(yīng)用中白子菜的側(cè)芽成活率只有85％-92％左右，因此不利于實際生產(chǎn)時白子菜側(cè)芽的培養(yǎng)使用，必須進行成活率的提高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種白子菜的培育方法，通過對側(cè)芽培養(yǎng)基的培養(yǎng)和增值栽培后的栽種方法改進，提高了白子菜的成活率。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下的技術(shù)方案，一種白子菜培育方法,所述方法包括如下步驟：

(1)培養(yǎng)基配制：配制改良MS誘導(dǎo)培養(yǎng)基：添加1.5mg/L的6-BA，0.1mg/L的NAA，PH值為5.5-6.5；

(2)側(cè)芽培養(yǎng)：取幼嫩白子菜幼嫩莖段流水沖洗并采用無菌處理后去除莖段水分，將每一個帶側(cè)芽的莖段切成0.8cm長，將切后的莖段放入MS培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，保持培養(yǎng)基的PH值為5.5-6.5的范圍內(nèi)，將切后的莖段在培養(yǎng)基中先進行2天的暗培養(yǎng)，在此期間每天向培養(yǎng)基加入瓊脂、蔗糖、維生素C，并保持培養(yǎng)基中的瓊脂、蔗糖、維生素C的濃度分別在：4.5g/L、24g/L、15mg/L之間，溫度為23℃，在通過強度為2100lx-2500lx的光照條件下培養(yǎng)22d。

增殖培養(yǎng)：將側(cè)芽培養(yǎng)完成后的莖段放入培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中肌醇的濃度為86mg/L、吲哚丁酸的濃度為0.05mg/L，培養(yǎng)時間為5d；

栽種：清洗莖段后置于空氣中鍛煉2天，移栽至大棚中，用薄膜覆蓋以保濕保溫，保持濕度在70％-80％之間、溫度在23攝氏度之間，并進行50％-60％的遮陰，20d后移除薄膜，側(cè)芽成活率為96％，4-6個月后進行收割。另外，清洗莖段后置于空氣溫度為20-22℃的空氣中鍛煉2-3天，并保持90％的空氣濕度。

本發(fā)明還公開了一種白子菜的黃酮提取方法,其特征在于，包括如步驟：

將白子菜全株自然風(fēng)干，研碎成粉末，加入溫度為42-70℃的石油醚，分別按照粉末和石油醚質(zhì)量比為1:2.5-4和1:5-7進行提取，每次提取的時間為1.5-2H，獲得提取粉末；在提取粉末中加入提取溶液，并采用60℃-70℃的水浴回流并過濾，獲得過濾后粉末；對過濾后粉末采用蒸餾水對提取物進行浸泡，分別用0.3mol/L的NaOH和0.3mol/L的HCl處理20-25分鐘，并用蒸餾水清洗至PH為5.5-6.5之間；采用梯度乙醇進行洗脫，并別收集洗脫液進行合并濃縮。

最為上述方案的進一步優(yōu)化，梯度乙醇的濃度分別為：35％乙醇、55％乙醇、75％乙醇、95％乙醇和無水乙醇，分別獲得各個濃度的乙醇洗脫液進行合并濃縮后，采用30％乙醇進行定容。

最為上述方案的進一步優(yōu)化，所述提取溶液分別為60％乙醇、60％甲醇和蒸餾水。

最為上述方案的進一步優(yōu)化，將合并濃縮后的洗脫液一起放置于循環(huán)回流裝置中進行回流提取，60-70℃條件下，回流提取3-4次，每次30-40min。

本發(fā)明提供的提高白子菜側(cè)芽成活率的方法，具有如下有益效果：

1.應(yīng)用本發(fā)明提供的一種白子菜培育方法，通過對白子菜的側(cè)芽培養(yǎng)基中添加蔗糖、瓊脂和維生素并保持在一定得濃度范圍之間且過程為暗培養(yǎng)，然后進行增值培養(yǎng)和栽種，通過多次試驗均可以提高側(cè)芽的成活率。

2.應(yīng)用本發(fā)明提供的一種白子菜的黃酮提取方法，先采用石油醚進行提取獲得粉末，然后采用水浴回流并過濾獲得粉末，分別用0.3mol/L的NaOH和0.3mol/L的HCl處理20-25分鐘，并用蒸餾水清洗至PH為5.5-6.5之間；采用梯度乙醇進行洗脫，并別收集洗脫液進行合并濃縮，可以使得白子菜的總黃酮含量提高了6％-10％。