[發(fā)明專利]改善質(zhì)譜檢測(cè)核酸結(jié)晶的方法及產(chǎn)品

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711049866.1
• 申請(qǐng)日: 2017-10-31
• 公開（公告）號(hào): CN108008003A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬慶偉;梁飛;付書輝;梁坤;趙明輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京毅新博創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N27/62
• 分類號(hào): G01N27/62;G01N1/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種改善質(zhì)譜檢測(cè)核酸樣本的結(jié)晶的方法，步驟包括：

(1)采用去離子水與高效液相色譜級(jí)的乙腈按照1:1-0.5:1的體積比混合，得到混合溶液；

(2)加入3-羥基-2-吡啶甲酸充分溶解，其中3-羥基-2-吡啶甲酸：混合溶液＝1-10：100(mg/ml)；

(3)取3-羥基-2-吡啶甲酸溶液和檸檬酸二胺溶液，按照1-3:1體積比混合均勻，過濾即得基質(zhì)溶液。

(4)選取0.5-1μL基質(zhì)溶液和0.5-1μL樣本，在芯片上進(jìn)行點(diǎn)樣結(jié)晶。

2.權(quán)利要求1的方法，其中步驟2中加入0.01-0.2mg的3-羥基-2-吡啶甲酸，并且通過2000-3000rpm震蕩3-10min，8000-12000rpm離心3-10min，得到3-羥基-2-吡啶甲酸溶液。

3.權(quán)利要求1的方法，其中步驟3中0.05mg的3-羥基-2-吡啶甲酸。

4.權(quán)利要求1的方法，其中步驟3中的檸檬酸二胺溶液的配制如下：稱量檸檬酸二胺置于離心管中，再加入去離子水進(jìn)行溶解，其中檸檬酸二胺的重量mg與去離子水體積mL比為1-5：100，在2000-3000rpm震蕩3-10min，8000-12000rpm離心3-10min，得到檸檬酸二胺溶液。

5.權(quán)利要求1的方法，其中步驟4中選取0.75μL基質(zhì)溶液和0.5μL樣本進(jìn)行結(jié)晶。

6.權(quán)利要求1-5的方法中所用的能夠提高質(zhì)譜檢測(cè)核酸靶分子的準(zhǔn)確率的質(zhì)譜芯片，該芯片包括：由硅材料或玻璃或鈦合金組成的芯片主體，其表面具有多個(gè)豎直交叉排列的親水區(qū)域定位孔、疏水孔外區(qū)域、中心校正孔、驗(yàn)證校正孔、備用校正孔；

其中，定位孔具有親水特性，用于滴定基質(zhì)溶液或樣本；疏水孔外區(qū)域，表面具有疏水特性；定位孔和孔外區(qū)域形成的微陣列芯片表面親疏水間隔的結(jié)構(gòu)，可以輔助液體樣本收縮凝聚在親水區(qū)域內(nèi)，使樣本結(jié)晶集中，且呈現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)圓形，提高離子化效率；

中心校正孔和驗(yàn)證校正孔，用于校正核酸標(biāo)準(zhǔn)的滴定位置驗(yàn)證校正孔，用來驗(yàn)證校正效果；

備用校正孔，作為備用，中心校正孔或驗(yàn)證校正孔如果出現(xiàn)異常，可用備用校正孔。

7.權(quán)利要求6的方法，其中定位孔在芯片上為(4-8)×(4-8)的豎直交叉方向排列，中心校正孔、驗(yàn)證校正孔以及備用校正孔在芯片中間位置豎向排列，數(shù)量均為1或2個(gè)。

8.權(quán)利要求7的方法，其中所述芯片親水性定位孔覆蓋150-800nm的親水性薄膜，疏水性孔外區(qū)覆蓋150nm-2μm疏水性薄膜，其表面水滴接觸角＞120°。

9.權(quán)利要求8的方法，其中所述親水性薄膜為二氧化硅氧化物薄膜、氧化鋅薄膜、氧化鋁薄膜等，疏水性孔外區(qū)通過硅烷偶聯(lián)劑進(jìn)行處理形成疏水性薄膜。

10.權(quán)利要求9的方法，其中所述硅烷偶聯(lián)劑選自乙烯基硅烷、氨基硅烷或二甲基二氯硅烷。