[發(fā)明專利]具有生物安全性的病原菌樣品前處理方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711044956.1 | 申請日： | 2017-10-31 |
| 公開（公告）號： | CN107917950B | 公開（公告）日： | 2021-01-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 肖迪;張建中 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所 |
| 主分類號： | G01N27/64 | 分類號： | G01N27/64;G01N1/38 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陳征 |
| 地址： | 102206 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 具有 生物 安全性 病原菌 樣品 處理 方法 | ||
1. 一種具有生物安全性的、適用于MALDI-TOF MS檢測的病原菌樣品前處理方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）試劑A在樣本制備套管上部的濾膜管中懸浮待測病原菌樣品， 8000～16000g離心1～10min后樣本制備套管下部的收集管中液體即為MALDI-TOF MS檢測上樣前微生物的蛋白樣本，所述試劑A為50～90％甲酸和80～100％乙腈的等體積混合液，所述濾膜管的濾膜孔徑范圍在0.003～0.2μm；其中，試劑A與待測微生物樣本的體積質(zhì)量比為10～50ul：1mg；
(2)步驟(1)得到的蛋白樣本直接檢測或凍干備用；若直接檢測，則將其加入質(zhì)譜樣本靶上，干燥后，按與蛋白樣本的體積比1:1在樣品上覆蓋基質(zhì)，所述基質(zhì)為α-氫基-4-羥基肉桂酸在1～5％三氟乙酸和40～60％乙腈水溶液中的過飽和液；
步驟(2)中，若蛋白樣本凍干備用，則再用于質(zhì)譜檢測前，需用試劑A進(jìn)行溶解。
2.如權(quán)利要求1所述的病原菌樣品前處理方法，其特征在于，離心條件均為13000g，離心5min。
3.如權(quán)利要求1所述的病原菌樣品前處理方法，其特征在于，病原菌樣品用量為0.5-5mg。
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的病原菌樣品前處理方法，其特征在于，試劑A與待測病原菌樣本的體積質(zhì)量比為20ul：1mg。
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