[發明專利]鹽酸特拉萬星原料中有關物質的檢測方法

有效

• 申請號: 201711044572.X
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN109725101B
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 馬嫣瓊;江竹蓮
• 申請（專利權）人: 正大天晴藥業集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測含有式III化合物的特拉萬星的分析方法，

包括：

a)將一個或多個批次的鹽酸特拉萬星樣品與溶劑混合，獲得溶液；

b)將步驟a)的溶液注入規格為3.0mm×150mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱中，顆粒度為2.7μm；

c)采用流動相A和流動相B的混合物作為洗脫劑，以體積比60:40至100:0進行梯度洗脫，流速為0.7-1.0mL/min，柱溫為50-60℃，檢測波長為230nm，在相對保留時間約33min從柱中洗脫得到鹽酸特拉萬星；

d)確定相對于特拉萬星，是否在相對保留時間約32min處有式III化合物的峰出現；

e)按峰面積歸一化法計算鹽酸特拉萬星樣品中式III化合物的含量；

其中，所述的流動相A為磷酸氫二鉀緩沖液、乙腈的混合溶劑，其混合比例為90：10，磷酸氫二鉀緩沖液濃度為20mM，用磷酸調節pH值至2.0；所述的流動相B為乙腈，以流動相A和流動相B進行梯度洗脫，時間/流動相A：0min/100v％；40min/92v％；50min/60v％；55min/60v％；56min/100v％；65min/100v％。

2.權利要求1所述的分析方法，其中所述的洗脫劑流速為0.8mL/min。

3.權利要求1所述的分析方法，其中所述的十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，柱溫為55℃。

4.一種檢測式III化合物的分析方法，

包括：

a)將一個或多個批次的式III化合物樣品與溶劑混合，獲得溶液；

b)將步驟a)的溶液注入規格為3.0mm×150mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱中，顆粒度為2.7μm；

c)采用流動相A和流動相B的混合物作為洗脫劑，以體積比60:40至100:0進行梯度洗脫，流速為0.8mL/min，柱溫為55℃，檢測波長為230nm，在相對保留時間約31.1min從柱中洗脫得到式III化合物；

d)按峰面積歸一化法計算式III化合物的含量；

其中，所述的流動相A為磷酸氫二鉀緩沖液、乙腈的混合溶劑，其混合比例為90：10，磷酸氫二鉀緩沖液濃度為20mM，用磷酸調節pH值至2.0；所述的流動相B為乙腈，以流動相A和流動相B進行梯度洗脫，時間/流動相A：0min/100v％；40min/92v％；50min/60v％；55min/60v％；56min/100v％；65min/100v％。

5.一種檢測含有式IV化合物的特拉萬星的分析方法，

包括：

a)將一個或多個批次的特拉萬星樣品與溶劑混合，獲得溶液；

b)將步驟a)的溶液注入規格為4.6mm×150mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱中，顆粒度為3.5μm；

c)采用流動相A和流動相B的混合物作為洗脫劑，以體積比60:40至92:8進行梯度洗脫，流速為0.7-1.0mL/min，柱溫為25-35℃，檢測波長為230nm；在相對保留時間約12min從柱中洗脫得到鹽酸特拉萬星；

d)確定相對于特拉萬星，是否在相對保留時間約7min處有式IV化合物的峰出現；

e)按峰面積歸一化法計算鹽酸特拉萬星樣品中式IV化合物的含量；

其中，所述的流動相A為0.1％磷酸溶液，流動相B為乙腈，以流動相A和流動相B進行梯度洗脫，時間/流動相A：0min/92v％；20min/60v％；30min/60v％；30.01min/92v％；40min/92v％。

6.權利要求5所述的分析方法，其中所述的洗脫劑流速為0.8mL/min。

7.權利要求5所述的分析方法，其中所述的十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，柱溫為30℃。

8.一種檢測式IV化合物的分析方法，

包括：

a)將一個或多個批次的式IV化合物樣品與溶劑混合，獲得溶液；

b)將步驟a)的溶液注入規格為4.6mm×150mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱中，顆粒度為2.7μm；

c)采用流動相A和流動相B的混合物作為洗脫劑，以體積比0:100至80:20進行梯度洗脫，流速為0.8mL/min，柱溫為30℃，檢測波長為230nm；在相對保留時間約23.6min從柱中洗脫得到式IV化合物；

d)按峰面積歸一化法計算式IV化合物的含量；

其中，所述的流動相A為0.1mol/L甲酸銨；用氨水調節pH值至7.5；所述的流動相B為0.1mol/L甲酸銨、乙腈的混合溶劑，其混合比例為80:20，其中，甲酸銨溶液用氨水調節pH值至7.5，以流動相A和流動相B進行梯度洗脫，時間/流動相A：0min/80v％；30min/50v％；35min/0v％；50min/0v％；50.01min/80v％；60min/80v％。