[發(fā)明專利]一種利用纖維素制備金合歡烯的工程菌株及方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711039647.5
• 申請日: 2017-10-30
• 公開（公告）號: CN109722403B
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高嵐;齊崴;尤生萍;陶志平;李妍;蘇榮欣;李寶石;藺建民
• 申請（專利權(quán)）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司石油化工科學(xué)研究院
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P19/14;C12P19/02;C12P5/02;C12R1/19
• 代理公司: 北京英創(chuàng)嘉友知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11447
• 代理人: 周建秋;耿超

1.一種工程菌株，其特征在于，該工程菌株是保藏編號為CGMCC NO.14817的大腸桿菌。

2.權(quán)利要求1所述的工程菌株在利用纖維素水解產(chǎn)物進行發(fā)酵產(chǎn)生金合歡烯中的用途。

3.一種利用纖維素制備金合歡烯的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)將含有纖維素的固態(tài)原料進行水解處理，得到含有單糖的水解產(chǎn)物；

(2)在包括所述含有單糖的水解產(chǎn)物的液態(tài)發(fā)酵原料中接種權(quán)利要求1所述的工程菌株，并進行發(fā)酵培養(yǎng)，得到培養(yǎng)后的物料。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中，

將含有纖維素的原料進行水解處理的步驟包括：

S1、將含有纖維素的固態(tài)原料先后進行酸預(yù)處理和堿預(yù)處理，或者先后進行堿預(yù)處理和酸預(yù)處理；

S2、將所述預(yù)處理后的固態(tài)物料進行酶促水解；

所述酸預(yù)處理為甲酸處理和/或稀硫酸處理；所述甲酸處理的條件包括：溫度為40～100℃，時間為1～10小時，相對每千克預(yù)處理的固體物料，甲酸溶液的體積為5～50升，所述甲酸溶液含有70～95wt％的甲酸和0～2wt％的HCl；所述稀硫酸處理的條件包括：溫度為80～150℃，時間為5分鐘～2小時，相對每千克預(yù)處理的固體物料，稀硫酸溶液的體積為5～50升，所述稀硫酸溶液含有0.5～10wt％的稀硫酸；

所述堿預(yù)處理為氨水處理和/或氫氧化鈉處理；所述氨水處理的條件包括：溫度為40～80℃，時間為2～24小時，相對每千克預(yù)處理的固體物料，氨水的體積為2～20升，所述氨水含有10-25wt％的NH₃；所述氫氧化鈉處理的條件包括：溫度為60～120℃，時間為1～12小時，相對每千克預(yù)處理的固體物料，氫氧化鈉水溶液的體積為5～50升，所述氫氧化鈉水溶液含有0.5～10wt％的氫氧化鈉；

所述酶促水解的條件包括：溫度30～70℃，時間3～72h，pH為4.0～6.0，每千克預(yù)處理后的固態(tài)物料，緩沖液的體積為5～100升，酶促水解所用的緩沖液含有0.01～1mol/L檸檬酸緩沖液和/或0.01～1mol/L的乙酸緩沖液，酶促水解所用的酶為纖維素酶和/或β-葡萄糖苷酶，所述纖維素酶加酶量為每克預(yù)處理后的固態(tài)物料10～500U，所述β-葡萄糖苷酶加酶量為每克預(yù)處理后的固態(tài)物料10～250U。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法，其中，發(fā)酵培養(yǎng)的條件包括：溫度為16～35℃，時間為3～120h，相對每升所述液態(tài)發(fā)酵原料，萃取劑的用量為50～1000mL，所述工程菌或工程菌株的接種量為(10～300)×10⁷個；所述的萃取劑選自正己烷、正癸烷、十二烷或煤油；每升所述液態(tài)發(fā)酵原料中，以單糖的量計算，所述含有單糖的水解產(chǎn)物的含量為0.01～0.9千克。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中，所述含有纖維素的原料包括秸稈、樹皮、木屑、玉米芯、米糠和麥麩中的至少一種。