[發明專利]一種核酸一體化多重檢測盒體及檢測方法

在審

• 申請號: 201711039337.3
• 申請日: 2017-10-28
• 公開（公告）號: CN108004129A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 唐勇軍;代建國
• 申請（專利權）人: 深圳職業技術學院
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/6844;C12N15/10
• 代理公司: 深圳市深聯知識產權代理事務所(普通合伙) 44357
• 代理人: 楊靜

1.一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，包括：

一個外殼，以及外殼內的兩層板，兩層板在外殼中上下疊放；

所述兩層板中的上層板設有九個腔室，其中八個是半球形凹槽腔室，另外一個是在上層板內嵌的腔室；所述八個半球形凹槽腔室，其中有四個是與流道連通，同時與所述的上層板內嵌腔室通過流道連通；另外四個半球形凹槽腔室均不與流道連通，各自相對獨立；

所述兩層板中的下層板設有五個腔室，其中四個是半球形凹槽腔室，另外一個是在下層板內嵌的腔室；所述四個半球形凹槽腔室均與流道連通，同時與所述的下層板內嵌腔室一端通過流道連通，所述的下層板內嵌腔室另一端與下層板內進樣流道一端連通。

2.根據權利要求1所述的一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，所述的上層板的半球形凹槽腔室位置和所述下層板的半球形凹槽腔室位置相互對應。

3.根據權利要求1所述的一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，所述的上層板的半球形凹槽腔室槽口向下，所述下層板的半球形凹槽腔室槽口向上，兩層板的腔室槽口徑大小相同，一一對應可形成完全的球形腔室。

4.根據權利要求1所述的一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，所述的上層板與所述下層板之間可以進行相對滑動。

5.根據權利要求1所述的一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，所述外殼為方形，外殼一個側面敞開，另一側面開有一小孔，其他各面均封閉。所述兩層流道板通過敞開的側面推入外殼中，形成完整的盒體。

6.根據權利要求1所述的一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，所述上層板內嵌的腔室另一端連通一小段氣壓平衡流道，流道出口與外殼一側面小孔相通。

7.根據權利要求1所述的一種核酸一體化多重檢測盒體，其特征在于，所述的上層板的四個相對獨立的半球形凹槽腔室內預裝有用于核酸等溫擴增檢測的試劑固體干粉。

8.一種采用權利要求1中所述的盒體進行核酸一體化多重檢測的方法，其特征在于，通過以下過程實現：

過程一、外界的進樣系統先通過所述下層板的進樣流道通入礦物油至下層板的內嵌腔室，再通過壓力系統將腔室中的礦物油驅動至連通的流道中，并排盡下層板內嵌腔室中的礦物油，排至上層板的內嵌腔室中；

過程二、將待測樣本和提取液通過進樣系統通入下層板的內嵌腔室，外界對內嵌腔室進行加熱溫度控制，將反應溫度控制在100℃，反應10分鐘，實現核酸的高溫一步法提??；

過程三、滑動上層板，使下層板與上層板的四個相對獨立的半球形凹槽腔室連通，形成四個球形腔室。

將過程二中反應后的液體驅動至四個球形腔室中，并充滿腔室，溶解預封裝在上層板半球形凹槽腔室內的核酸等溫擴增檢測的試劑固體干粉，外界輔助混勻試劑；

過程四、進樣系統再次通入礦物油至下層板的內嵌腔室，并驅動至下層板的流道中；

過程五、對上層板的四個相對獨立的半球形凹槽腔室進行加熱溫度控制，將反應溫度控制在65℃，反應30分鐘。反應過程中應熒光檢測裝置進行反應物的實時檢測。反應結束后通過觀察熒光檢測裝置顯示的各個腔室的熒光曲線，判斷多重檢測的結果。