[發(fā)明專利]一種煙曲霉菌液體培養(yǎng)基

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711038956.0
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN109722389B
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發(fā)明（設計）人: 張貴民;朱兵峰;李陽;范振華
• 申請（專利權）人: 魯南新時代生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，提供了一種煙曲霉菌的液體培養(yǎng)基，即在煙曲霉NRRL2436液體培養(yǎng)基中添加不溶性強堿弱酸鹽粉末，減少了煙曲霉液體培養(yǎng)過程中菌球的形成，使菌體以細小菌球或分散菌絲形式存在，減少了大小不一菌球的形成，實現(xiàn)了煙曲霉液體培養(yǎng)的均質化，同時顯著的提高了煙曲霉素發(fā)酵效價。

技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種煙曲霉菌液體培養(yǎng)基。

背景技術

煙曲霉素是煙曲霉產生的抗生素，由三個異戊烯聚合而成的，屬于萜烯和甾體化合物有關的次級代謝產物。煙曲霉素對微孢子蟲病和阿米巴蟲病有特殊療效，此外，煙曲霉素已被證實能抑制內皮細胞增生和血管生成，從而具有抗癌活性。煙曲霉素的許多衍生類似物也能抑制血管增生和甲硫氨酰氨肽酶活性，有些衍生物(XMT-1107、TNP-470、CKD-732、CKD-1061、PPI-2458)在抗癌和減肥方面已經進入臨床研究。因此，煙曲霉素作為醫(yī)藥中間體的地位也越來越重要。

煙曲霉素可以通過煙曲霉液體發(fā)酵培養(yǎng)的方法獲得(US764710)。但是在煙曲霉液體發(fā)酵培養(yǎng)過程中，煙曲霉極易成球且掛壁生長(Wen Yang et al.,Effects ofcarboxymethylcel lulose and carboxypolymethylene on morphology of Aspergillusfumigates NRRL 2346and Fumagillin Production,2003,24-27)。菌體若形成細小均一的菌球，可以減少粘度，提高氧傳質，但是若菌球過大且不均一，往往導致培養(yǎng)液均質性差、重現(xiàn)性低。同時，菌球過大也會使菌球內部營養(yǎng)缺乏，從而減少代謝產率。因此，在煙曲霉素液體發(fā)酵研究和生產中，控制煙曲霉菌體成為分散均質的菌絲體或均質的細小菌球是煙曲霉素高產穩(wěn)產的關鍵。

發(fā)明內容

針對以上問題，本發(fā)明提供了一種煙曲霉菌的液體培養(yǎng)基，克服了煙曲霉菌在液體培養(yǎng)過程中形成大小不一的菌絲球和嚴重掛壁現(xiàn)象，從而使實驗研究和生產具有較好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。

本發(fā)明技術方案包括以下步驟：

一種煙曲霉菌的液體培養(yǎng)基，煙曲霉菌液體培養(yǎng)基中添加不溶性強堿弱酸鹽粉末。

所述的液體培養(yǎng)基中，所述不溶性強堿弱酸鹽粉末選自磷酸鈣、磷酸鎂、碳酸鎂、碳酸鋇、碳酸鈣中的一種。優(yōu)選為磷酸鈣。

所述的液體培養(yǎng)基中，所述不溶性強堿弱酸鹽粉末的添加量為5-30g/L，優(yōu)選的是10-20g/L，最優(yōu)選的是15g/L。

優(yōu)選地，所述的液體培養(yǎng)基，還包含：葡萄糖或淀粉或糊精30-45g/L。

優(yōu)選地，所述的液體培養(yǎng)基，還包含：玉米漿15-25g/L。

優(yōu)選地，所述的液體培養(yǎng)基，pH調至7.5以下。

優(yōu)選地，所述液體培養(yǎng)基還含有谷氨酸5g/L。

培養(yǎng)過程中，斜面培養(yǎng)基可以是現(xiàn)有技術斜面培養(yǎng)基，也可以為下述培養(yǎng)基：

(1)(g/L)：葡萄糖20，酵母浸膏20，胰蛋白胨1，瓊脂粉20，pH6.7。

(2)(g/L)：甘油7.5，蔗糖9.4，七水硫酸鎂0.05，磷酸氫二鉀0.06，氯化鈉4，胰蛋白胨5，瓊脂粉20，pH6.7。

(3)(g/L)：甘油7.5，蔗糖9.4，七水硫酸鎂0.05，磷酸氫二鉀0.06，氯化鈉4，胰蛋白胨5，瓊脂粉20，pH6.7。

(4)(g/L)：甘油7.5，蔗糖9.4，七水硫酸鎂0.05，磷酸氫二鉀0.06，氯化鈉4，胰蛋白胨5，瓊脂粉20，pH6.7。

本發(fā)明技術方案菌種為：