[發(fā)明專利]壯藥九層樓總黃酮含量測(cè)定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711034076.6
• 申請(qǐng)日: 2017-10-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107860733A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-03-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱華;黎理;王曉燕;謝鳳鳳;戴忠華;張淼
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/33
• 分類號(hào): G01N21/33;G01N21/31
• 代理公司: 南寧啟創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙)45122
• 代理人: 經(jīng)國(guó)富

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種壯藥九層樓總黃酮含量測(cè)定方法。

背景技術(shù)

我國(guó)壯族主要集中于廣西自治區(qū)，據(jù)該區(qū)有關(guān)部門調(diào)查，壯藥共有709種。《壯族民間用藥選編》收載常用壯藥500多種。具有地方民族特色的壯藥主要有：廣西馬兜鈴、千斤拔、龍船花、閉鞘姜，陽(yáng)桃、兩面針、雞蛋花、刺芋、金錦香、南蛇簕、薯莨、馬鬃蛇、褐家鼠、蟒蛇等。

九層樓，別名鹿藥、盤龍七、偏頭七、螃蟹七、白窩兒七、獅子七，山糜子，為百合科鹿藥屬植物鹿藥的根莖及根，有藥用價(jià)值。常生于林下及山坡陰處。分布中國(guó)西南、西北、東北和華北等地。九層樓，性味“甘、苦、溫，無(wú)毒”。具有補(bǔ)氣益腎、祛風(fēng)除濕、活血調(diào)經(jīng)功能，用于治療風(fēng)濕骨痛，神經(jīng)性頭痛，乳腺炎，月經(jīng)不調(diào)，癰癤腫毒，跌打損傷等。黃酮類化合物是存在于植物界的一類天然色素，為許多中草藥的有效成分，趙淑杰等進(jìn)行了《高速逆流色譜分離與鑒定鹿藥中黃酮類化合物》的研究，分離純化鹿藥中的化學(xué)成分，得到5個(gè)黃酮類化合物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種準(zhǔn)確、快速的壯藥九層樓總黃酮含量的測(cè)定方法。

本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

壯藥九層樓總黃酮含量測(cè)定方法，先以蘆丁為對(duì)照品配制成梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度法，測(cè)定梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；再將九層樓提取物配制成供試品溶液，測(cè)定供試品溶液吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出供試品溶液濃度，最后根據(jù)配制溶液時(shí)的稀釋倍數(shù)計(jì)算出九層樓總黃酮含量，具體操作步驟為：

(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：精密稱取干燥至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，加入75％乙醇超聲溶解，冷卻至室溫后定容至刻度，制成濃度為400-500ug/ml的蘆丁對(duì)照品母液；精密量取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml的蘆丁對(duì)照品母液分別置于容量瓶中，加入適量75％乙醇，然后依次按照量取的蘆丁對(duì)照品母液體積，以體積比為1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1的順序分別加入5％亞硝酸鈉溶液和10％硝酸鋁溶液，再按照量取的蘆丁對(duì)照品母液體積，以體積比為1:10、2:10、3:10、4:10、5:10、6:10的順序加入10％氫氧化鈉溶液，最后加入75％乙醇定容至刻度，震蕩搖勻，靜置，即得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：取步驟(1)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以未添加對(duì)照品溶液為空白，通過(guò)紫外-分光光度法，在510nm處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，以濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)供試樣品溶液的制備：精密稱取九層樓提取物，置于三角錐形瓶中，加入75％乙醇溶解并定容；精密量取1ml置于容量瓶中，加入適量75％乙醇，然后依次按照量取的蘆丁對(duì)照品母液體積，以體積比為1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1的順序分別加入5％亞硝酸鈉溶液和10％硝酸鋁溶液，再按照量取的蘆丁對(duì)照品母液體積，以體積比為1:10、2:10:、3:10、4:10、5:10、6:10的順序加入10％氫氧化鈉溶液，最后加入75％乙醇定容至刻度，震蕩搖勻，靜置，即得供試樣品溶液；

(4)總黃酮含量測(cè)定：將供試樣品溶液采用紫外-分光光度法，在510nm處測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取供試品溶液濃度，根據(jù)配制溶液時(shí)的稀釋倍數(shù)計(jì)算出九層樓總黃酮含量，即得。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，步驟(1)和步驟(3)所述加入5％亞硝酸鈉溶液后，放置6min。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，步驟(1)和步驟(3)所述加入10％硝酸鋁溶液后，放置6min。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，步驟(1)和步驟(3)所述靜置的時(shí)間為15min。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速，精密度、重現(xiàn)性、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性均良好，通過(guò)測(cè)定壯藥九層樓總黃酮的含量，從而有效控制九層樓總黃酮相同物質(zhì)的質(zhì)量。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不限于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

實(shí)施例1九層樓藥材中總黃酮的含量測(cè)定，具體操作步驟為：