[發明專利]提升溶菌酶產量及活性的方法在審
| 申請號: | 201711026976.6 | 申請日: | 2017-10-27 |
| 公開(公告)號: | CN109722445A | 公開(公告)日: | 2019-05-07 |
| 發明(設計)人: | 陳純琪;王韜;黃建文;郭瑞庭 | 申請(專利權)人: | 成都必高生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/81 | 分類號: | C12N15/81;C12N9/36;C12R1/84 |
| 代理公司: | 隆天知識產權代理有限公司 72003 | 代理人: | 馮志云;王芝艷 |
| 地址: | 610041 四川省成都市*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 溶菌酶 表達載體 伴侶蛋白 畢赤酵母 轉染 工業應用 共表達 構筑 生產成本 | ||
1.一種提升溶菌酶產量及活性的方法,其包含下列步驟:
(a)構筑一溶菌酶Rham的表達載體;
(b)將該溶菌酶Rham的表達載體轉染至一畢赤酵母內;
(c)構筑一伴侶蛋白PDI或Ero1p的表達載體;以及
(d)將該伴侶蛋白PDI或Ero1p的表達載體轉染至該畢赤酵母內,以進行溶菌酶Rham與伴侶蛋白PDI或Ero1p的共表達。
2.如權利要求1所述的方法,其中該溶菌酶Rham的表達載體為表達具有序列編號2或與序列編號2有80%以上序列相似度的氨基酸序列的蛋白。
3.如權利要求2所述的方法,其中該溶菌酶Rham基因為從美洲鴕鳥(Rhea americana)的蛋清中所分離出來。
4.如權利要求1所述的方法,其中該溶菌酶Rham為一鵝型溶菌酶。
5.如權利要求1所述的方法,其中該伴侶蛋白PDI的表達載體為表達具有序列編號4或與序列編號4有80%以上序列相似度的氨基酸序列的蛋白。
6.如權利要求1所述的方法,其中該伴侶蛋白Ero1p的表達載體為表達具有序列編號6或與序列編號6有80%以上序列相似度的氨基酸序列的蛋白。
7.如權利要求1所述的方法,其中步驟(a)所用的載體為pPICZαA。
8.如權利要求1所述的方法,其中步驟(c)所用的載體為pPICZ。
9.如權利要求1所述的方法,其中步驟(b)更包含進行溶菌酶Rham的表達,并篩選出高表達溶菌酶Rham的重組菌株的步驟。
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