[發明專利]一種同時測定玄參中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法

在審

• 申請號: 201711024939.1
• 申請日: 2017-10-27
• 公開（公告）號: CN107807187A
• 公開（公告）日: 2018-03-16
• 發明（設計）人: 劉群;吳統選;楊榮平;談宗華;周文杰;胡華東
• 申請（專利權）人: 天圣制藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 重慶弘旭專利代理有限責任公司50209
• 代理人: 韋永華

1.一種同時測定玄參中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于，采用如下步驟：將玄參藥材粉末過三號篩，精密稱定0.5 重量份，置具塞錐形瓶中，精密加入80％甲醇20 體積份，密塞，稱定重量，浸泡1小時，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用80％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，得到供試品溶液；精密稱取經五氧化二磷干燥10 h的哈巴俄苷苷對照品、肉桂酸對照品及哈巴苷對照品適量，分別加30％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液，分別精密吸取哈巴俄苷、哈巴苷及肉桂酸對照品儲備液適量，加30％甲醇制成每1mL分別含哈巴苷、肉桂酸、哈巴俄苷58.2、4.098、9.6 μg的混合對照品溶液，得到對照品溶液；使用ODS-AQ色譜柱，以0.1％磷酸水溶液-乙腈為流動相進行梯度洗脫，流速0.8-1.2 mL/min，柱溫25-35℃，檢測波長210 nm；然后根據肉桂酸與玄參藥材粉末、哈巴俄苷與玄參藥材粉末以及哈巴苷與玄參藥材粉末各自的線性關系計算玄參粉末中的肉桂酸、哈巴俄苷、哈巴苷的含量。

2.如權利要求1所述的同時測定玄參中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：使用ODS-AQ色譜柱，以0.1％磷酸水溶液為A流動相，乙腈為B流動相，進行梯度洗脫，流速0.8mL/min，柱溫35℃，檢測波長210 nm。

3.如權利要求1所述的同時測定玄參中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：以0.1％磷酸水溶液為A流動相，乙腈為B流動相，按照以下程序進行梯度洗脫： B流動相的梯度為0～10 min，3％； 10～20 min，3％ →22％；20～60 min，22％；60～ 70 min，22％→3％。

4.如權利要求1所述的同時測定玄參中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：檢測的環境溫度為20-25℃，空氣濕度75-78%。

5.如權利要求1-4任一項所述同時測定玄參中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：玄參藥材粉末為炮制的玄參飲片磨粉而成，炮制工藝為玄參藥材除去殘留根莖和雜質，加水噴潤，防置19min，蒸置72min，冷至室溫，切成1-2mm的薄片，于49℃鼓風干燥箱中干燥48h，既得。

6.一種玄參的炮制方法，包括炮制和檢測步驟，其特征在于，采用如下步驟：

（1） 玄參的炮制：玄參藥材出去殘留根莖和雜質，加水噴潤，防置19min，蒸置72min，冷至室溫，切成1-2mm的薄片，于49℃鼓風干燥箱中干燥48h，得玄參飲片；

（2）將步驟（1）制得的玄參飲片磨成粉，過三號篩，精密稱定0.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入80％甲醇20 mL，密塞，稱定重量，浸泡1小時，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用80％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，得到供試品溶液；精密稱取經五氧化二磷干燥10 h的哈巴俄苷苷對照品、肉桂酸對照品及哈巴苷對照品適量，分別加30％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液，分別精密吸取哈巴俄苷、哈巴苷及肉桂酸對照品儲備液適量，加30％甲醇制成每1mL分別含哈巴苷、肉桂酸、哈巴俄苷58.2、4.098、9.6 μg的混合對照品溶液，得到對照品溶液；使用ODS-AQ色譜柱，以0.1％磷酸水溶液為A流動相，乙腈為B流動相，按照以下程序進行梯度洗脫： B流動相的梯度為0～10 min，3％； 10～20 min，3％ →22％；20～60 min，22％；60～ 70 min，22％→3％，流速0.8 mL/min，柱溫35℃，檢測波長210 nm；按下式計算玄參粉末中的肉桂酸、哈巴俄苷、哈巴苷的含量：

肉桂酸 y_肉桂酸=6465700x_肉桂酸-4021.3；

哈巴俄苷 y_哈巴俄苷=1978700x_哈巴俄苷-4662.6；

哈巴苷 y_哈巴苷=393630x_哈巴苷-4165；

其中y_肉桂酸表示肉桂酸利用高效液相色譜儀進行檢測出的峰面積，x_肉桂酸表示肉桂酸的進樣質量； y_哈巴俄苷表示哈巴俄苷利用高效液相色譜儀進行檢測出的峰面積，x_哈巴俄苷表示哈巴俄苷的進樣質量；y_哈巴苷表示哈巴苷利用高效液相色譜儀進行檢測出的峰面積，x_哈巴苷表示哈巴苷的進樣質量。