[發明專利]提高桃雜交成苗率的方法

在審

• 申請號: 201711017042.6
• 申請日: 2017-10-26
• 公開（公告）號: CN107750948A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 許建蘭;馬瑞娟;俞明亮;丁輝
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙)32274
• 代理人: 洪洋

技術領域

本發明涉及到一種提高桃雜交成苗率的方法，屬于植物育種技術領域。

背景技術

在桃育種過程中，受各種因素的影響，桃雜交授粉成功率及早熟桃胚培養成功率達不到100％，所以種子處理成苗率在后期顯得尤為重要。桃的常規育種方法為：采收成熟果實后，先削去外面的果肉，露出種核，再在相對干凈的地方，用鐵錘敲破種核，取出種仁，期間用力不當會將種仁敲碎，后放到燒杯中于超凈工作臺上進行消毒處理，先75％酒精消毒5秒，且要求不停晃動，然后消毒好的無菌水沖洗6次，再放到0.1％升汞中進行消毒5分鐘，期間不停晃動，后無菌水沖洗6次，然后接種到培養基或培養皿中。此方法的缺點是消毒前果實去果肉浪費很多的人力，75％酒精消毒時間以秒為單位較難掌握，0.1％升汞消毒，升汞屬于劇毒藥品，前后共需要無菌水沖洗12次，給消毒工作帶來一定的麻煩。且早熟桃胚培養處理過程復雜，有時大量果實成熟時在較短時間內較難完成接種工作，需將果實放置冷庫，但成熟度較高果實貯藏時容易爛果，由于交叉污染，影響優質果率，進而影響胚培養成功率。且由于早熟桃胚培苗在培養室培養時，長出的葉片或莖段由于靠近管壁生長或一些特殊情況，導致生長葉片或莖段枯萎，植株不能正常生長，進而影響成苗率。

另外傳統中晚熟桃處理采用培養皿處理技術是在培養皿底部平鋪一層棉花以達到保濕的效果，在種子發芽后，根系會鉆到棉絮下面，不易觀察根系生長的長短，不能很好的掌握播種時間。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提高桃雜交成苗率的方法。

本發明提供如下技術方案：一種提高桃雜交成苗率的方法,包括以下步驟：

A、桃果實的采收：早熟桃在果實七成熟時采收，中晚熟桃在果實成熟時采收；

B、早熟桃消毒：整果放置到75％酒精中進行第一次消毒處理，時間5～10分鐘，然后直接從酒精中撈出，放置到20％的次氯酸鈉溶液中進行第二次消毒處理，時間15～30分鐘，最后從次氯酸鈉溶液中取出，在超凈工作臺通過剪刀將果實剪開，取出種仁直接接種到培養基中；

中晚熟桃消毒：剪開桃核，取種仁，種仁置于75％酒精消毒2分鐘，然后無菌水沖洗6次，放置到培養皿中；

C、培養：將早熟桃種仁放置于試管培養，試管培養為在試管中加入滅菌處理的改良WPM培養基，投入種仁后封口膜封口，后置于3±2℃環境低溫處理3個月；

其中每一升改良WPM培養基中包括如下:

1650mg硝酸銨、1900mg硝酸鉀、440mg二水氯化鈣、370mg七水硫酸鎂和170mg磷酸二氫鉀，提供大量元素；

6.2mg硼酸、22.3mg四水硫酸錳、8.6mg七水硫酸鋅、0.25mg二水鉬酸鈉和0.25mg五水硫酸銅，提供微量元素；

37.2mg乙二胺四乙酸二鈉和27.4mg硫酸亞鐵，提供鐵鹽；

1.0mg鹽酸硫胺素、0.5mg鹽酸毗哆醇、0.5mg煙酸、2mg甘氨酸和l00mg肌醇，提供有機物；

瓊脂粉和蔗糖；

將中晚熟桃種仁放置于培養皿培養，培養皿培養為在培養皿中放置4層濾紙，加入無菌水，將種仁平放在濾紙上，蓋上培養皿蓋，保鮮膜封口以保濕；

D、中晚熟桃種子播種：待培養皿中的種子胚根長到3cm以上播種，播種前將塑料缽中的營養土澆透水，在塑料缽營養土中間戳小洞，將種子胚根放入其中，子葉留在洞口外，最后在上面覆蓋一層干土，保濕；

早熟桃苗移栽：待培養基中種胚胚根萌動，放置于組培室進行培養5周后移栽，移栽前穴盤營養土澆透水，去子葉，將植株根系植入土中，并壓實、保濕。

優選的，步驟C中試管中倒入培養基，高度在5cm以上；直徑6cm的培養皿加水量為5毫升，直徑12cm的培養皿加水量為8毫升。

優選的，步驟D中種胚胚根萌動至長度為0.5～1cm時移入組培室，葉片5片以上時移栽。

本發明早熟桃果實七成熟時采收，而非傳統的果實成熟時采收，可提高果實采收后在低溫的貯藏時間，進而保證完整果率。且七成熟的果實果肉較脆，在取種時，只要剪刀對準位置，可以輕松將果核打開，取出種仁。

本發明采用整果消毒技術，不僅省工省力，而且時間掌握比較容易，在很長時間范圍內都不會對種子產生影響，剪刀取種只要剪開種核就行，種子不需再消毒就可接種到培養基中。整果消毒法大大提高雜交果實的成苗率，污染率可控制在0～5％之間。

本發明對WPM培養基做了較大調整，可促進冷藏后的種仁在子葉邊重新長出新芽，這樣可以確保植株正常生長，進而提高成苗率。