[發(fā)明專(zhuān)利]一種解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711013149.3
• 申請(qǐng)日: 2017-10-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107586766B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜昱光;焦思明;馮翠;賈培媛;任立世;程功
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N9/24
• 分類(lèi)號(hào): C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12P19/26;C12P19/14
• 代理公司: 北京方安思達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11472
• 代理人: 陳琳琳;張紅生

1.一種解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一種解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶基因，其特征在于：編碼權(quán)利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶基因，其特征在于：該基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.包含權(quán)利要求2或3所述解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶基因的重組表達(dá)載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組表達(dá)載體，其特征在于：所述表達(dá)載體為pGBG1，表達(dá)載體pGBG1通過(guò)如下方式獲得：

將表達(dá)載體pPIC9中的如SEQ ID NO.4所示信號(hào)肽序列進(jìn)行密碼子優(yōu)化，獲得適合在畢赤酵母中表達(dá)的如SEQ ID NO.5所示信號(hào)肽序列；

利用Nsi I/Xho I雙酶切，將表達(dá)載體pPIC9中的如SEQ ID NO.4所示的信號(hào)肽序列替換為如SEQ ID NO.5所示的信號(hào)肽序列，得到表達(dá)載體pGBG1。

6.一種權(quán)利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：將權(quán)利要求4或5所述的重組表達(dá)載體導(dǎo)入畢赤酵母細(xì)胞，誘導(dǎo)并獲得分泌表達(dá)的解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：所述畢赤酵母細(xì)胞為GS115。

8.權(quán)利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶在殼聚糖或幾丁質(zhì)降解中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶單獨(dú)用于殼聚糖降解制備獲得殼寡糖；或者所述解淀粉芽孢桿菌殼聚糖酶與其他幾丁質(zhì)酶或殼聚糖酶混合使用，協(xié)同降解殼聚糖或幾丁質(zhì)。