[發(fā)明專利]一組新型酯酶及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711009481.2
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN109706133B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊廣宇;馬富強(qiáng);馮雁;栗林勝男;鐘孟庭
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/70;C12P41/00;C12P7/40
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;馬思敏

1.一種酯酶，屬于α/β水解酶家族，其催化活性中心包含有“絲氨酸-組氨酸-天冬氨酸”催化三聯(lián)體，其特征在于，所述酯酶在SEQ ID No: 2的基礎(chǔ)上發(fā)生以下位置的突變，

所述的突變選自：

（2）第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第41位谷氨酸被賴氨酸取代+第209位異亮氨酸被纈氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代+第302位天冬酰胺被絲氨酸取代；

（3）第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第41位谷氨酸被賴氨酸取代+第209位異亮氨酸被纈氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代；

（5）第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第209位異亮氨酸被纈氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代+第216位絲氨酸被甘氨酸取代；

（6）第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第37位天冬酰胺被絲氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代+第216位絲氨酸被甘氨酸取代+第302位天冬酰胺被絲氨酸取代。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酯酶，其特征在于，所述酯酶對以2-芳基丙酸類分子具有立體選擇性。

3.一種多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸編碼如權(quán)利要求1-2所述的任一酯酶。

4.一種表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體包含有權(quán)利要求3所述的多核苷酸。

5.一種基因工程化的細(xì)胞，其特征在于，所述的細(xì)胞包括權(quán)利要求4所述的表達(dá)載體或其基因組中整合有權(quán)利要求3所述的多核苷酸。

6.一種手性分子的拆分方法，其特征在于，在生物酶法催化系統(tǒng)中，將如權(quán)利要求1-2任一所述的酯酶作用于消旋體底物，所述的消旋體底物為2-芳基丙酸類分子的酯類衍生物。

7.一種權(quán)利要求1-2任一所述的酯酶的用途，其特征在于，用于制備非甾體類抗炎藥，所述酯酶用于催化2-芳基丙酸分子的酯類衍生物，從而獲得非甾體類抗炎藥。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述的非甾體類抗炎藥為單一構(gòu)型手性產(chǎn)物。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述非甾體類抗炎藥為S型或R型布洛芬類化合物。