[發明專利]白術內酯IV用于制備CIK細胞凍存液的用途

有效

• 申請號: 201711009308.2
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN107581187B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 王莉;胡芳;關凱
• 申請（專利權）人: 山東興瑞生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京華識知識產權代理有限公司 11530
• 代理人: 喬浩剛

本發明公開了白術內酯IV用于制備CIK細胞凍存液的用途，該CIK細胞凍存液包括無血清培養基、血清和二甲基亞砜，還含有白術內酯IV，無血清培養基為RPMI 1640，血清為胎牛血清或所述CIK細胞供體的自體血清，優選CIK細胞供體的自體血清，無血清培養基、血清和二甲基亞砜按照體積比5:4:1混合。本發明發現白術內酯IV可以提高CIK細胞的凍存復蘇率，且不影響CIK細胞對腫瘤細胞的殺傷活性，可以制備成CIK細胞凍存液用于CIK細胞的凍存，以保證患者在放射治療和化學治療后能夠回輸足量的CIK細胞。

技術領域

本發明屬于細胞凍存保護領域，涉及CIK細胞凍存液，具體涉及白術內酯IV用于制備CIK細胞凍存液的用途。

背景技術

凍存是最常用的細胞貯藏手段，大多數腫瘤細胞經凍存復蘇后仍然保持原有特性。而CIK這一類人工誘導培養的異質性細胞，凍存時間和體系都會對其免疫表型及殺傷活性產生一定影響(參考文獻：不同凍存時間對CIK細胞免疫表型及殺傷活性的影響，現代腫瘤醫學，2016；不同方式凍存的外周血干細胞復蘇培養CIK細胞的實驗研究，現代診斷與治療，2014；凍存對細胞因子誘導的殺傷細胞免疫表型及細胞內因子表達的影響，鄭州大學學報，2014)。

為保證患者在放射治療和化學治療后能夠回輸足量的CIK細胞，有必要開發一種既能降低凍存對CIK細胞損傷又不影響其殺瘤活性的細胞凍存液。

白術內酯類成分為白術的主要有效成分，目前已發現如下結構的白術內酯：

申請人發現各白術內酯具有不同的活性，經檢索，未發現白術內酯IV用于制備CIK細胞凍存液的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供白術內酯IV用于制備CIK細胞凍存液的用途。

實現本發明上述目的技術方案如下：

白術內酯IV用于制備CIK細胞凍存液的用途。

一種CIK細胞凍存液，包括無血清培養基、血清和二甲基亞砜，還含有白術內酯IV。

優選地，無血清培養基為RPMI 1640。

優選地，所述血清為胎牛血清或CIK細胞供體的自體血清，優選CIK細胞供體自體血清。

優選地，所述無血清培養基、血清和二甲基亞砜按照體積比5:4:1混合。

優選地，白術內酯IV在無血清培養基、血清和二甲基亞砜混合液中的濃度為15-35μM。

本發明的突出優點：

本發明發現白術內酯IV可以提高CIK細胞的凍存復蘇率，且不影響CIK細胞對腫瘤細胞的殺傷活性，可以制備成CIK細胞凍存液用于CIK細胞的凍存，以保證患者在放射治療和化學治療后能夠回輸足量的CIK細胞。

附圖說明

圖1為CIK細胞活率檢測結果；

圖2為CIK細胞腫瘤殺傷活性測定結果。

具體實施方式

下面就結合實施例具體介紹本發明的實質性內容，由于篇幅原因，實驗過程的描述無法做到非常詳細，凡是實驗中未詳細描述的部分均為本領域技術人員熟知的常規操作。

一、實驗材料

白術內酯IV、白術內酯Ⅰ和白術內酯Ⅲ自制，純度大于98％。

二、實驗方法

1、外周血單個核細胞(PBMC)的分離