[發明專利]輔因子再生分枝桿菌及其在油水雙液相發酵中的應用在審
| 申請號: | 201711005536.2 | 申請日: | 2017-10-25 |
| 公開(公告)號: | CN107779423A | 公開(公告)日: | 2018-03-09 |
| 發明(設計)人: | 王敏;蘇立秋;申雁冰;商志華;高田;張文凱;駱健美 | 申請(專利權)人: | 天津科技大學 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/74;C12P33/02;C12R1/32 |
| 代理公司: | 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙)11617 | 代理人: | 栗華楠 |
| 地址: | 300222 天*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 因子 再生 分枝桿菌 及其 油水 雙液相 發酵 中的 應用 | ||
1.一株產雄烯二酮的基因工程菌MNR M3N2,其特征在于,所述基因工程菌是以編號為CICC21097的新金分枝桿菌(Mycobacterium sp.)MNR M3為宿主細胞,異源表達NADH氧化酶基因nox-2所得,所述nox-2的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。
2.權利要求1所述基因工程菌MNR M3N2的構建方法,其特征在于,具體如下:
(1)將nox-2基因和表達質粒pMV261通過酶切,連接,構建pMV261-nox-2重組質粒;
(2)將重組質粒pMV261-nox-2導入MNR M3的感受態菌株中,獲得的陽性轉化子即為本發明新構建菌株MNR M3N2。
3.權利要求1所述基因工程菌MNR M3N2在油水雙液相發酵體系中的應用。
4.權利要求3所述基因工程菌MNR M3N2的應用,其特征在于,所述基因工程菌MNR M3N2在油水雙液相發酵體系中發酵生產雄烯二酮的方法如下:
將MNR M3N2按5-10%接種量接種入油水雙液相發酵培養基中,28-32℃,130-250r/min,pH6.5-7.8條件下,發酵4-8天;
所述油水雙液相發酵培養基組成如下:K2HPO4 0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,檸檬酸鐵銨0.05g/L,檸檬酸2g/L,磷酸氫二銨3.5g/L,葡萄糖10g/L,油相10-20%,其余為水,pH6.5-7.8。
5.權利要求4所述基因工程菌MNR M3N2的應用,其特征在于,所述油相為植物油,選自大豆油、葵花油、菜籽油、花生油、米糠油或妥爾油中的至少一種。
6.權利要求4所述基因工程菌MNR M3N2的應用,其特征在于,所述油水雙液相發酵培養基中還添加0.5-8g/L的乳化劑。
7.權利要求6所述基因工程菌MNR M3N2的應用,其特征在于,所述的乳化劑為卵磷脂、Tween 80、Span 80、蔗糖酯以及單甘酯中的至少一種。
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