[發明專利]一種利用長鏈非編碼RNA檢測膀胱癌的試劑盒

有效

• 申請號: 201711002908.6
• 申請日: 2017-10-24
• 公開（公告）號: CN107604068B
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 李翀;李書成
• 申請（專利權）人: 李翀
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 北京華清迪源知識產權代理有限公司 11577
• 代理人: 武媛;呂學文

本發明公開了一種利用長鏈非編碼RNA檢測膀胱癌的試劑盒，所述試劑盒包括：如SEQ?ID?No.2所述的上游引物和SEQ?ID?No.3所述的下游引物；探針；包含SEQ?ID?No.1所述核酸序列的標準DNA模板；PCR反應液。本發明的利用長鏈非編碼RNA檢測膀胱癌的試劑盒，選擇長鏈非編碼RNA?lncRNA?TMP125對膀胱癌組織的檢測，對膀胱癌的檢測效果好，具有較高的靈敏度和特異性。

技術領域

本發明涉及檢測試劑盒技術領域，具體涉及一種膀胱癌基因檢測試劑盒。

背景技術

膀胱癌為泌尿系最常見的惡性腫瘤，在我國發病率居泌尿系統腫瘤的第一位。膀胱癌極易復發，發掘一種能用于早期篩查和預后監測的新型膀胱癌標志物，顯得尤為重要。長鏈非編碼RNA(lncRNA)是指長度超過200個核苷酸、具有調控基因表達作用的非編碼RNA。研究發現，lncRNA參與了細胞內多種重要生命活動，雖無蛋白質編碼功能，但可通過表觀遺傳修飾調控基因表達，與腫瘤的發生、發展密不可分。近年來，lncRNA與膀胱癌的關系也逐漸受到關注，一些具有極為重要的lncRNA有望成為膀胱癌診斷的生物標志物及治療的分子靶點。

傳統的膀胱癌的檢測中，極少用到lncRNA作為檢測的標志物，雖然經過大量的研究，但是仍為發現有效的以lncRNA作為檢測的標志物，亟待進一步研發一種以lncRNA作為檢測標志物的檢測試劑盒。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用長鏈非編碼RNA檢測膀胱癌的試劑盒，用以解決現有技術中存在的對膀胱癌檢測的特異性及靈敏度較差的缺陷。

為解決上述技術問題，本發明提供一種利用長鏈非編碼RNA檢測膀胱癌的試劑盒，

所述試劑盒包括：

如SEQ?ID?No.2所述的上游引物和SEQ?ID?No.3所述的下游引物；

熒光標記物；

包含SEQ?ID?No.1所述核酸序列的標準DNA模板；

PCR反應液。

優選的，所述PCR反應液包括2×Super?TaqMan?Onestep?Buffer，Super?OnestepEnzyme，探針，RNase-Free?Water。

優選的，PCR反應體系為25ul反應體系，其中，2xSuper?TaqMan?Onestep?Buffer12.5ul；上游引物，10uM，0.5ul；下游引物，10uM，0.5ul；探針，10pM，0.5ul；Super?OnestepEnzyme，1.0ul；RNA?Template，10pg-100ng。

優選的，所述標準模板DNA轉化到DH5α感受態細胞中，為提取的含有SEQ?ID?No.1所示序列的質粒。

優選的，所述熒光標記物為SYBR?Green、TaqMan探針、分子信標、雙雜交探針或復合探針。

優選的，所述TaqMan探針序列如SEQ?ID?No.4所示。

優選的，所述試劑盒還包括RNA的提取試劑，所述RNA的提取試劑為Thermo?FisherScientific公司的TRIzol試劑。

優選的，所述試劑盒還包括核酸定量儀。

優選的，所述試劑盒還包括熒光定量擴增儀。

本發明具有如下優點：