[發明專利]鉤吻生物堿作為有毒蜂蜜的生物標志物的應用

在審

• 申請號: 201711000363.5
• 申請日: 2017-10-24
• 公開（公告）號: CN108008056A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 楊術鵬;李熠;周金慧;張金振;金玥;王鵬;趙文
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;王璐

1.一種檢測蜂蜜中是否含有鉤吻有毒蜂蜜的方法，其特征在于，

蜂蜜樣本在檢測前，進行前處理：取蜂蜜樣本加入水中溶解，混勻使蜂蜜完全溶解，利用乙腈提取有機相；

采用UHPLC-HRMS檢測蜂蜜樣本，通過查看其圖譜中是否含有鉤吻素甲和鉤吻素己的特征峰，判定蜂蜜是否為有毒蜂蜜；

鉤吻素甲在UHPLC-HRMS的精確提取粒子流色譜圖中含有m/z323.17595([M+H]⁺)準分子離子峰，其精確質量數的誤差應當小于5ppm；鉤吻素己在UHPLC-HRMS的精確提取粒子流色譜圖中含有m/z327.17087([M+H]⁺)準分子離子峰，其精確質量數的誤差應當小于5ppm；

此外，鉤吻素甲的MS/MS圖譜中應含有碎片離子m/z 70.06589、m/z 86.06054、m/z159.08033、m/z 236.10679和m/z 262.12221；鉤吻素己的MS/MS圖譜中應含有碎片離子m/z71.07370、m/z 143.07291、m/z 225.10174、m/z 265.13335和m/z 296.15195；上述MS/MS圖譜中碎片離子的精確質量數誤差應當小于5ppm；

采用UHPLC-Q Exactive plus對蜂蜜樣本進行檢測時的液相條件如下：化合物的分離采用C18色譜柱，以0.1％的甲酸水為流動相A，0.1％的甲酸乙腈為B，采用梯度洗脫程序分離：0-1.0min，5％的B；1.0-2.0min，5-20％的B；2.0-6.5min，20-50％的B；6.5-7.0min，50-80％的B；7.0-7.1min，80-100％的B；7.1-8.5min，100％B；8.5-8.6min，100-5％的B；8.6-10min，95％的B；液相的流速為0.30mL/min；進樣量為3.0uL。