[發明專利]一種具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白多肽及其制備方法

在審

• 申請號: 201711000146.6
• 申請日: 2017-10-24
• 公開（公告）號: CN107557422A
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發明（設計）人: 高丹丹;陳士恩;田曉靜;李明生;丁功濤
• 申請（專利權）人: 西北民族大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/30
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司36115
• 代理人: 劉華

1.一種具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白ACE抑制肽，其特征在于：制備方法為：

(1)脫酚棉籽粕粉按料液比為1：25(g/mL)加入蒸餾水，用1mol/L NaOH溶液調節體系pH值至11.5，在50℃下浸提2h，然后6000r/min離心15min，分離得上清液，用1mol/L的鹽酸溶液調節上清液的pH值至等電點4.3，再10000r/min離心15min，得到蛋白質沉淀，經透析、真空冷凍干燥得到棉籽蛋白質干粉；

(2)棉籽蛋白質干粉配成質量分數為5％的棉籽蛋白質溶液，調節pH值至7.5，加入木瓜蛋白酶(30000U/mL，E/S＝1.2％)，43.5℃下水解4h，然后95℃水浴滅酶15min，再加入4ml質量分數為10％的三氯乙酸TCA，10000r/min離心15min(沉降酶蛋白和未酶解的棉籽蛋白質)，收集上清液，真空冷凍干燥得到棉籽蛋白ACE抑制肽；

(3)將棉籽蛋白ACE抑制肽用蒸餾水配制成底物濃度為10％的懸浮液，按酶與底物濃度比為2000.11U/g的比例加入木瓜蛋白酶，再按0.5mol/mol棉籽蛋白ACE抑制肽游離氨基的外源氨基酸比例加入亮氨酸，調節pH值至7.5，30℃恒溫水浴5h，95℃水浴滅酶15min，冷卻至室溫，10000r/min離心15min，收集上清液，真空冷凍干燥，即得。