[發明專利]混菌系統、利用其分解半纖維素的方法及生產酒精的方法

有效

• 申請號: 201710998368.5
• 申請日: 2017-10-24
• 公開（公告）號: CN109694890B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 朱一民;魏毓宏;蔡伸隆
• 申請（專利權）人: 朱一民;長春人造樹脂廠股份有限公司;長春石油化學股份有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/02;C12P7/10;C12N1/19;C12N9/42
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所 44237
• 代理人: 官建紅

1.一種生物質酒精的生產方法，其特征在于，包含：

重組至少三組酵母菌，以得到至少三組重組酵母菌，其中該至少三組重組酵母菌包含：

至少兩組半纖維素轉化菌，其表達各組間互不相同的融合蛋白，該融合蛋白分別為錨定蛋白與各組間互不相同的半纖維素分解酶的組合，且該錨定蛋白具有錨定至該至少兩組半纖維素轉化菌表面的能力；以及

至少一組五碳糖發酵菌，其表達五碳糖發酵酶；

共培養該至少三組重組酵母菌；

使半纖維素接觸該半纖維素分解酶，以得到五碳糖；以及

使該五碳糖發酵酶將該五碳糖轉化為生物質酒精；

其特征在于，表達該半纖維素分解酶的基因包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5或其組合；

其特征在于，表達該融合蛋白的基因包含SEQ ID NO:6及SEQ ID NO:7；

其特征在于，該五碳糖發酵酶包含木糖還原酶、木酮糖激酶或其組合。

2.如權利要求1所述的生產方法，其特征在于，其是重組六組該酵母菌以得到六組該重組酵母菌，其包含：

五組該半纖維素轉化菌，分別表達由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4及SEQ ID NO:5表達的該半纖維素分解酶；以及

一組該五碳糖發酵菌，表達木糖還原酶、木酮糖激酶或其組合。

3.如權利要求2中所述的生產方法，其特征在于，該半纖維素轉化菌的總細胞數量與該五碳糖發酵菌的總細胞數量的比例為2：1到8：1。

4.如權利要求2中所述的生產方法，其特征在于，該半纖維素轉化菌中，表達SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及SEQ ID NO:5的細胞間數量比例為10～20：5～20：5～15：1～15：30～79。

5.一種半纖維素的分解方法，其特征在于，包含：

重組至少三組酵母菌，以得到至少三組重組酵母菌，其中該至少三組重組酵母菌包含：

至少兩組半纖維素轉化菌，其表達各組間互不相同的融合蛋白，該融合蛋白分別為錨定蛋白與各組間互不相同的半纖維素分解酶的組合，且該錨定蛋白具有錨定至該至少兩組半纖維素轉化菌表面的能力；

共培養該至少三組重組酵母菌；以及

使半纖維素接觸該半纖維素分解酶，以將該半纖維素分解為五碳糖；

其特征在于，表達該半纖維素分解酶的基因包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5或其組合；

其特征在于，表達該融合蛋白的基因包含SEQ ID NO:6及SEQ ID NO:7；

其特征在于，該五碳糖發酵酶包含木糖還原酶、木酮糖激酶或其組合。

6.一種混菌系統，其特征在于，包含：

共培養的至少三組重組酵母菌，其中該至少三組重組酵母菌包含：

至少兩組半纖維素轉化菌，其表達各組間互不相同的融合蛋白，該融合蛋白分別為錨定蛋白與各組間互不相同的半纖維素分解酶的組合，且該錨定蛋白具有錨定至該至少兩組半纖維素轉化菌表面的能力；以及

至少一組五碳糖發酵菌，其表達五碳糖發酵酶；

其特征在于，表達該半纖維素分解酶的基因包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5或其組合；

其特征在于，表達該融合蛋白的基因包含SEQ ID NO:6及SEQ ID NO:7；

其特征在于，該五碳糖發酵酶包含木糖還原酶、木酮糖激酶或其組合。