[發明專利]一種巴戟天低聚糖成分的鑒別方法

有效

• 申請號: 201710996983.2
• 申請日: 2017-10-20
• 公開（公告）號: CN107843663B
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 黃璐琦;郝慶秀;郭蘭萍;康利平;朱壽東;余意;胡明華;馬方勵
• 申請（專利權）人: 中國中醫科學院中藥研究所;無限極（中國）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;吳愛琴

本發明提供了一種基于UPLC?QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鑒別方法。包括：制備樣品溶液及對照品溶液；采用UPLC?QTof/MS進行檢測，根據檢測結果，確定巴戟天低聚糖成分。本發明優化了巴戟天藥材低聚糖的色譜和質譜分離和檢測條件，利用Acquity UPLC BEH Amide C18柱，通過UPLC?QTof/MS檢測系統，成功分離并鑒定了巴戟天藥材中19個低聚糖成分，為巴戟天創新藥物開發研究提供科學依據。

技術領域

本發明屬于中藥化學成分分析技術領域，具體涉及一種基于UPLC-QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鑒別方法。

背景技術

中藥巴戟天為茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的干燥根，主產于廣東、福建、廣西、海南等地，是傳統補腎陽的良藥，為四大南藥之一，具有補腎陽，強筋骨，祛風濕功效。巴戟天主要含有糖類、脂類、蒽醌、有機酸等成分。目前，從巴戟天藥材中分離鑒定的糖類成分有果糖、蔗糖、巴戟甲素、蔗果三糖、耐斯糖、IF-果呋喃糖基耐斯糖、菊粉二糖至七糖。低聚糖因其廣泛的生物活性是目前研究熱點之一，但是目前對巴戟天中藥效顯著的低聚糖糖產品的研發相對滯后，低聚糖的鑒定主要采取提取、分離和純化或衍生化后，再利用核磁共振譜、質譜等方法鑒別，實驗耗時長，費用大；并且未見有對巴戟天低聚糖成分進行全面表征的研究報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種基于UPLC-QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鑒別方法。

本發明所提供的基于UPLC-QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鑒別方法，包括下述步驟：

1)制備樣品溶液及對照品溶液：

將巴戟天的根干燥、粉碎、過篩，用甲醇水溶液超聲提取，離心，收集上清液，將上清液過濾，得到樣品溶液，備用；

用甲醇水溶液將對照品溶解，得到對照品溶液，備用；

2)采用UPLC-QTof/MS進行檢測，根據檢測結果，確定巴戟天低聚糖成分。

上述方法步驟1)中，所述過篩具體可為過40目篩。

所述甲醇水溶液具體可為體積濃度30％的甲醇水溶液。

所述超聲提取在室溫下進行。

所述超聲提取可進行多次，具體可為2次。

每次超聲提取的時間可為30min。

所述離心的條件可為12000g離心10min。

所述過濾可為經0.2μm微孔濾膜過濾。

所述對照品為：1F-果呋喃糖基耐斯糖、D(+)葡萄糖、蔗糖、蔗果三糖以及耐斯糖，純度均≥98％。

上述方法步驟2)中檢測的實驗條件如下：

色譜條件：

色譜柱：Acquity UPLC BEH Amide C18(2.1x 100mm，1.7μm)；

流動相A：80％乙腈水溶液(v/v，含0.1％氨水)，流動相B：30％乙腈水溶液(v/v，含0.1％氨水)；

洗脫梯度：0～0.5min(0→0A，即洗脫液是100％的流動相B)，0.5～2.0min(0→10％A)，2.0～2.5min(10％→13％A)，2.5～9.0min(18％→34％A)，9.0～14min(34％→50％A)，14～16min(50％→60％A)，16～18min(60％→60％A)；

柱溫35℃；

流速：200μL·min^-1；

進樣量：1.0μL。