[發(fā)明專利]一種低糖基化普魯寧的制備及其在抗炎平喘藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710993668.4
• 申請日: 2017-10-23
• 公開（公告）號: CN107573393A
• 公開（公告）日: 2018-01-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周金林;盧宇靖;郭曉路;黃寶華;林麗薇;李慧靈;鄧誠
• 申請（專利權(quán)）人: 梅州金柚康健康科技有限公司
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/00;A61K31/7048;A61P29/00;A61P11/06;C12P19/14;C12P19/00
• 代理公司: 杭州知瑞知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司33271
• 代理人: 陳宜芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種低糖基化普魯寧的制備及其在抗炎平喘藥物中的應(yīng)用

技術(shù)背景

咳、痰、喘是呼吸系統(tǒng)疾病的常見癥狀，日常生活中尤常見于急、慢性支氣管炎、感冒等所引起，臨床是以咳嗽、咯痰伴有喘息及反復(fù)發(fā)作為特征，是由于感染或非感染因素引起的氣管、支氣管粘膜及周圍組織的急、慢性非特異性炎癥。屬中醫(yī)學(xué)的咳嗽、痰飲、哮喘范疇，是一種常見病、多發(fā)病。特別是中老年人由于環(huán)境因素和生活習(xí)慣的影響，容易產(chǎn)生咳嗽、咯痰等支氣管炎癥狀，發(fā)病期間沒有很好的進(jìn)行治療控制，而逐漸發(fā)展成為疾病的。支氣管哮喘 (哮喘)是臨床常見病和多發(fā)病，近年來發(fā)病率呈上升趨勢。其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。鑒于人體試驗(yàn)的局限性，目前對哮喘病因、發(fā)病機(jī)制及治療等方面的研究很大程度上需要通過動物模型來進(jìn)行，建立良好的支氣管哮喘動物模型具有重要意義。

目前已上市的該類藥物還是具有服藥量多和服用不方便的特點(diǎn)，而且效果并不明顯。因此有必要繼續(xù)研制出服用安全、療效可靠的平喘抗炎新藥物。柚皮素是黃酮類化合物的苷元，是一種黃酮類物質(zhì)，具有，抗菌，消炎，抗癌，解痙和利膽，治療心血管疾病，降膽固醇等方面的作用。研究表明黃酮化合物在治療平喘抗炎方面有很好的療效，因此，制備溶解度高，效果好、服用方便的平喘抗炎的黃酮化合物是本發(fā)明的宗旨。本發(fā)明以小鼠和家兔為動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ万?yàn)證了低糖基化普魯寧在抗炎平喘中的效果，經(jīng)過試驗(yàn)驗(yàn)證低糖基化普魯寧比傳統(tǒng)的止抗炎平喘的效果更為顯著。

黃酮化合物廣泛存在于蕓香科植物中，不同類型的黃酮類化合物在人體中的代謝途徑和生物利用度不同，苷元型黃酮化合物易于人體的吸收和利用，可通過小腸壁直接吸收進(jìn)入血液，而糖苷型的黃酮化合物需要在腸腔中微生物的作用下，通過降解和代謝途徑轉(zhuǎn)化為苷元型黃酮，才能被人體吸收和利用。因此，苷元型黃酮化合物具有更高的生物利用價值和營養(yǎng)價值。但苷元型黃酮一般在水中的溶解度低，不利于苷元黃酮的生物利用和發(fā)揮黃酮苷元的藥效。因此，為增加苷元黃酮的溶解性，科研人員在溶劑中加入堿如：在溶液中加入 NaOH、KOH等，或者加入有機(jī)溶劑如：乙醇，二甲基亞砜等，大大提高苷元黃酮的溶解性，但是強(qiáng)堿和有機(jī)溶劑對人體有害，會限制苷元黃酮開發(fā)利用。

普魯寧是單糖基化柚皮素，國內(nèi)外的藥理研究表明：普魯寧具有殺菌、抗氧化、抗病毒、抗缺血、抗腫瘤、消炎、抗過敏等多種藥理活性(Grzechulska J，ApplCatal B，2002，36(1):45－51；Daghrir R，Ind Eng Chem Res，2013，52 (10):3581－3599)。普魯寧最初由南朝鮮民間藥物山桃中提取得到的，其在自然界中主要分布于蘇木科、薔薇科、大戟科等植物中。其在自然界中含量少且提取率低，又因水溶性、脂溶性差，較難獲得，價格昂貴。目前普魯寧的制備方法主要有一下兩種，化學(xué)合成法和酶法水解柚皮苷法。相對于化學(xué)法合成普魯寧，反應(yīng)條件苛刻、產(chǎn)物分離繁瑣且對環(huán)境危害大的缺點(diǎn)；利用酶法(α-L- 鼠李糖苷酶切掉柚苷鼠李糖糖基后得到普魯寧(胡群芳Modern Food Science and Technology 2015,Vol.31,No.1))水解柚苷制備普魯寧的條件溫和、轉(zhuǎn)化率高、安全環(huán)保，因此研究酶法制備普魯寧具有很高的應(yīng)用價值。但是普魯寧在水中溶性和脂溶性都極低(＜10mg/L)，這大大限制了普魯寧的應(yīng)用，使普魯寧生物利用度較低。

本發(fā)明旨在提高普魯寧的在水中的溶解度，來提高普魯寧的生物利用度。因此，本發(fā)明通過2次酶法獲得低糖基化普魯寧溶解度是普魯寧的75倍以上，藥物制劑的半衰期也有明顯的延長，低糖基化普魯寧生物利用度提高10倍以上。具體實(shí)施方法如下：

一種低糖基化普魯寧，其特征在于化學(xué)結(jié)構(gòu)式如I所示：

其中

R₁＝H,

其中n ＝1～3；

R₂＝H或Rha；

低糖基化普魯寧制備自高糖基化母體，其結(jié)構(gòu)式如Ⅱ所示：

R₁＝H,

n＝ 4～10；

R₂＝H，Rha；

高糖基化普魯寧制備自柚苷、柚皮素、普魯寧等柑橘或者柚子提取物；在對普魯寧高糖基化時，糖基化酶為UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶等得到高糖基化普魯寧(糖基化程度為4-10個糖基)。高糖基普魯寧用α-L-鼠李糖苷酶、葡萄糖淀粉酶、木糖聚酶制備低糖基化普魯寧(糖基化程度小于4個糖基)。